沉默MTDH基因?qū)ξ赴┘?xì)胞SGC-7901趨化遷移的影響.pdf

1、 分類號(hào) ： 密級(jí) ： U D C ：學(xué)號(hào) ：T20082030 南 昌 大 學(xué) 碩 士 研 究 生 學(xué) 位 論 文 沉默 沉默 MTDH 基因?qū)ξ赴┘?xì)胞 基因?qū)ξ赴┘?xì)胞 SGC-7901 趨化遷移的影響 趨化遷移的影響 Effects of down-regulating MTDH Gene on the Chemotaxis a

2、nd Migration in Human Gastric Cancer Cells 蔣莉萍 蔣莉萍 培養(yǎng)單位（院、系） ：井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院 指導(dǎo)教師姓名、職稱：肖鳳 教授 申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué) 學(xué)科專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué) 論文答辯日期：2014 年 6 月 答辯委員會(huì)主席： 評(píng)閱人： 2014 年 6 月 摘要 II 摘 要 摘 要 目的 目的：胃癌是消化系統(tǒng)

3、常見的惡性腫瘤之一，當(dāng)前主要治療是外科手術(shù)聯(lián)合放化療，但是療效仍不理想，患者 5 年生存率很低。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是其術(shù)后易復(fù)發(fā)、預(yù)后差的最主要原因，而腫瘤細(xì)胞向微血管內(nèi)皮趨化遷移是腫瘤發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)事件。本研究擬研究 MTDH 與胃癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及MTDH/AEG-1 對(duì)胃癌細(xì)胞 SGC-7901 趨化遷移的影響。 方法： 方法： 采用免疫組化 SP 法檢測(cè) MTDH/AEG-1 基因在 30 例胃癌組織及其癌旁組織和 10 例對(duì)

4、照正常組織中的表達(dá)；構(gòu)建針對(duì) MTDH/AEG-1 的干擾載體，轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞株 SGC-7901，獲得穩(wěn)定細(xì)胞株；采用倒置熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率； western blotting 檢測(cè)干擾效率； 趨化實(shí)驗(yàn) （Transwell） 檢測(cè)沉默 MTDH/AEG-1表達(dá)的胃癌細(xì)胞株 SGC-7901 向人臍血內(nèi)皮細(xì)胞的趨化情況；遷移實(shí)驗(yàn)（Transwell） 檢測(cè)沉默 MTDH/AEG-1 表達(dá)的胃癌細(xì)胞株 SGC-7901 的遷移情況。結(jié)

5、果： 結(jié)果： 1. 免疫組化結(jié)果顯示：①M(fèi)TDH 蛋白在胃癌組織的表達(dá)情況：胃癌組織的MTDH 蛋白表達(dá)量(86.7%)明顯高于癌旁組織 （36.7%） 及對(duì)照正常組織 （10%, 均p0.05） 。 2. 熒光倒置顯微鏡鏡下觀結(jié)果顯示：3 個(gè)重組載體 pGPU6/shMTDH-1,2,3和一個(gè)陰性對(duì)照組 pGPU6/shMTDH-NC 由脂質(zhì)體介導(dǎo)成功轉(zhuǎn)染胃癌 SGC7901 細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率達(dá) 70%左右。 3. Western bl