siRNA干擾Survivin對人胃癌SGC-7901細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:探討siRNA干擾Survivin基因表達(dá)對人胃癌SGC-7901細(xì)胞周期、增殖、凋亡的影響及其作用機(jī)制的初步探討。
　　方法:針對Survivin mRNA序列設(shè)計(jì)合成siRNA轉(zhuǎn)染人胃癌SGC-7901細(xì)胞。MTT法檢測SGC-7901細(xì)胞增殖;RT-PCR法檢測Survivin、Caspase-3基因表達(dá);Western blot檢測Survivin、Caspase-3蛋白表達(dá);細(xì)胞免疫組織化學(xué)檢測Survivin蛋白

2、表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測SGC-7901細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:Survivin siRNA能夠有效抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞中Survivin的表達(dá),與空白對照組比較,Survivin siRNA組人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長、增殖速度減緩(p<0.05);PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示, Survivin siRNA組凋亡率為(30.0％±0.85),高于空白對照組(1.61%±0.46)、脂質(zhì)體組(2.35%±0.

3、51)及陰性對照組(3.80%±0.73)(p<0.05);Survivin siRNA組細(xì)胞聚集在G0/G1期,S期細(xì)胞減少(p<0.05);Survivin在 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著下調(diào)(p<0.05),而Caspase-3在 mRNA水平變化不明顯(p>0.05),而在蛋白表達(dá)水平明顯升高(p<0.05)。
　　結(jié)論
　　1.Survivin siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可明顯抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞中Surviv