食欲素A對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞生長(zhǎng)的影響.pdf

1、目的：觀察食欲素A(Orexin A，OA)對(duì)體外培養(yǎng)的胃癌SGC7901細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，并初步探討其影響胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制。
　　方法：常規(guī)培養(yǎng)胃癌SGC7901細(xì)胞，單獨(dú)食欲素A處理及SB408124預(yù)處理后再用食欲素A作用，MTT法檢測(cè)藥物對(duì)SGC7901細(xì)胞抑制率;Hoechst33258熒光染色法及流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化及凋亡情況;Western blot法檢測(cè)Bcl-2、Bax、Cytc和活化Caspase-3蛋

2、白的表達(dá)。
　　結(jié)果： MTT法顯示，不同濃度的食欲素A對(duì)胃癌SGC7901細(xì)胞作用不同的時(shí)間后，其對(duì)細(xì)胞呈現(xiàn)劑量-時(shí)間依賴性的生長(zhǎng)抑制，其中1.0μmol/L食欲素A作用24h后，對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，抑制率為65.32％±2.51％(P＜0.01);Hoechst33258熒光染色法顯示，食欲素A組出現(xiàn)較多凋亡細(xì)胞:細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)濃染致密的藍(lán)色熒光，有明顯的核固縮，凋亡率為20.55％±2.34％;采用食欲素A受

3、體選擇性拮抗劑SB408124(10μmol/L)預(yù)處理后，可使胃癌細(xì)胞的凋亡率明顯降低到12.13％±3.44％(P＜0.05);流式細(xì)胞儀檢測(cè)示1.0μmol/L食欲素A作用24h后凋亡率為59.52％±1.38％，而SB408124預(yù)處理后，再用食欲素A處理24h，SGC7901細(xì)胞凋亡率降為38.96％±1.82％(P＜0.05); Western blot法結(jié)果提示，食欲素A可上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白Bax、Cyt c和活化Caspa