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文檔簡介
1、目的:研究自噬與凋亡機制在阻斷PI3K/NF-kB通路的SGC7901細胞死亡中的作用。 方法:選用胃中分化腺癌SGC7901細胞株,采用MTT法測定對SGC7901細胞增殖的抑制作用;應用流式細胞技術(shù)檢測對于SGC7901細胞周期、線粒體膜電位和凋亡的影響,應用MDC熒光染色、LC3免疫熒光標記法和透射電鏡觀察給藥后自噬和凋亡的發(fā)生以及細胞超微結(jié)構(gòu)的變化;采用western blot研究在SGC7901細胞死亡中的分子機制。
2、 結(jié)果:LY294002可以抑制細胞的生長,通過上調(diào)自噬水平,引起線粒體膜電位的降低,并進而促進細胞凋亡,導致胃癌SGC7901死亡的發(fā)生。證明PI3K信號傳導通路的阻斷可以通過上調(diào)自噬水平來促進細胞凋亡,使自噬相關(guān)蛋白LC3及Beclinl表達增強,并可以上調(diào)p53和PUMA的表達。對NF-kB p65核轉(zhuǎn)位的阻斷可以抑制細胞的生長,引起線粒體膜電位的降低,促進自噬性死亡的發(fā)生,使自噬特異性蛋白LC3和自噬相關(guān)蛋白Beclinl
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