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1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)染BRMS1基因?qū)ξ赴㏒GC7901細(xì)胞增殖及體外侵襲力的影響姓名:向德雨申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):外科學(xué)(普外)指導(dǎo)教師:揭志剛20080601AbstractABSTRACTPurpose:WilleukaryoticexpressionvectorpcDNA3I(一)B/myeBRMS1tmnsfectedintoSGC7901gastriccancel“cells,BRMSlobservedinvitr

2、ogeneSGC7901cellproliferationandinvasioncapacityofMethod=ConventionalcultureofgastriccancercellsSGC7901,RTPCRmethodtodetectSGC7901gastriccancel“cellsBRMS1mRNAexpression;WithliposomesLIPOFECTAMINE2000willpcDNA31/mychis()B

3、andpcDNA31/myeBRMSItransfectedintogastricCanCercellsSGC7901,48hourSaftertransfectionwith300ug/mloftheG418pressurescreening28days,Resistancetobeformedafterthecloningofhumanbeingswim96cellcultureplatelimiteddilutionpickfro

4、mmonoclonal,Monoclonalwilluse170ug/mloftheG418tomaintainandexpandscreeningtraining;AfterthetrainWasamplifiedbyRTPCRandWesternBlotmethodscomparebeforeandafterthetransferBRMS1changesingeneexpressionFromtransfeetedBRMS1them

5、ostobviouschangesingeneexpressioninthecellcloningmethoddrawnbyMTTcellgrowthcurve,Boydenchamber、)l,imimprovedlinesofcellsinvitroinvasionandmetastasisexperimentResults:SGC7901gastricCanCercellsingeneexpressionwithoutBRMS1;

6、TransfectioneukaryoticexpressionvectorpcDNA31()B/mye—BRMSlGroupreeeiyesthreemonoclonal,WerenamedasSGC7901R1,SGC7901R2,SGC7901R3;TransfectedwithemptyvectorpeDNA31/myehis()BgroupreceivedtwomonoclonM,WerenamedasSGC7901一VI,S

7、GC7901一V2;ByRTPCRtestaftertransfectionBRMS1mRNAexpressionchanges;SeetransferofeukaryoticexpressionvectorofonlythreemonoclonalSGC7901R3hasBRMS1geneexpression,TransferofPgroupoftwomonoclonalnoBRMS1geneexpressio;WillSGC7901

8、,SGC7901V1,SGC7901一R3cellsweredrawnbyMTTmethodofgrowthcurve,Theresultsshowthat:BRMS1genedoesnotaffectgastricCanCercellproliferationSGC7901;Boydellchamberwithimprovedlinesofcellsinvitroinvasionandmetastasisexperiment,Ther

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