miR-711對胃癌SGC-7901細胞侵襲遷移及增殖的影響.pdf

1、目的：利用 Transwell侵襲實驗、細胞劃痕實驗、MTT實驗分別探討 miR-711在人胃癌細胞SGC-7901侵襲遷移及增殖中的作用,為miR-711在胃癌中防治作用提供理論依據。
　　方法：通過脂質體瞬時轉染法將miR-711過表達（miR-711 mimics）、miR-711抑制表達（miR-711 inhibitors）、miRNA空質粒轉染人胃癌細胞株SGC-7901,以miRNA空質粒轉染組作為陰性對照組（NC組

2、），以空白轉染組作為空白對照組(control組)。轉染48小時后在熒光顯微鏡下觀察轉染效率，Real-time PCR驗證轉染后各組中miR-711的表達，Transwell侵襲實驗檢測細胞的侵襲能力，細胞劃痕實驗檢測細胞的遷移能力，MTT實驗檢測細胞的增殖能力。
　　結果：
　　(1)轉染48小時后，在熒光顯微鏡下觀察計數，miR-711過表達及miR-711抑制表達、miRNA空質粒轉染人胃癌細胞SGC-7901,轉染

3、效率達75％以上；Real-time PCR檢測不同轉染組中miR-711的相對表達量，miR-711過表達轉染組、miR-711抑制表達轉染組及陰性對照組中的miR-711表達量分別是空白對照組的7658.6倍、0.35倍、1.2倍。
　　(2)Transwell侵襲實驗結果顯示(轉染48小時后即細胞接種24h后,平均每低倍鏡*100倍下觀察)：1）與空白對照組穿膜細胞數39.5±1.9比較，miR-711過表達轉染組穿膜細胞數

4、12.1±1.4，明顯下降,兩者比較 P<0.05；2） miR-711抑制表達轉染組穿膜細胞數為53.5±2.5，與空白對照組39.5±1.9比較有顯著性差異P<0.05；3)空質粒轉染組穿膜細胞數33.5±2.1，與空白對照組39.5±1.9比較，差異無統(tǒng)計學意義P>0.05。
　　（3）劃痕實驗顯示：劃痕后24小時miR-711過表達轉染組SGC-7901細胞愈合率為23.8%±3.2%，與空白對照組36.5%±2.6%比較

5、P<0.05；miR-711抑制表達組SGC-7901細胞愈合率為48.7%±4.5%，與空白對照組36.5%±2.6%比較P<0.05；48小時miR-711過表達轉染組SGC-7901細胞愈合率為56.2%±3.5%，與空白組76.3%±2.5%比較 P<0.05； miR-711抑制表達轉染組SGC-7901細胞愈合率為88.7%±4.3%，與空白組76.3%±2.5%比較P<0.05。
　　(4)MTT實驗結果顯示SGC-

6、7901細胞轉染miR-711過表達后48h、72h、96h(即接種后24h、48h、72h)，其增殖抑制率呈時間依賴性增加，依次為7.2%、8.3%、10.7%，與空白轉染組比較，均P<0.05；SGC-7901細胞轉染miR-711抑制表達后48h、72h、96h，其增殖率呈時間依賴性增加，依次為6.5%、8.6%、9.3%，與空白轉染組比較，均P<0.05；陰性對照組與空白轉染組比較無顯著性差異（P>0.05）。
　　結論：