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1、學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師( 或指導小組) 的指導下,由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權(quán)對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學,試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學所有。否則,承擔相應法律責任。研究生簽名:s 、院霞導師簽章:1 宋沫&莒二級學院領導蓋章:’f 許l I河北醫(yī)科
2、大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責自負。研究生簽名:麥4 之霞 導師簽章:束淑雷3 - o I 侔f 1 月中文摘要青藤堿對人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞E M T 的作用機制研究摘 要目的:研究青藤堿( S I N ) 對人胃癌細胞S G C .7 9
3、0 1 增殖、侵襲以及轉(zhuǎn)移相關基因和蛋白表達的影響。方法:1 細胞存活率檢測:用不同濃度S I N 處理人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞后,用W S T .1 法檢測不同處理時間的細胞存活率。2M M P 表達:用不同濃度S I N 處理人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞,E L I S A檢測M M P .2 和M M P .9 在細胞培養(yǎng)基中的含量變化。3 R T .P C R 檢測不同濃度S I N 對人胃癌S G
4、C .7 9 0 1 細胞相關E M T 基因m R N A 表達水平的影響。4W e s t e r nb l o t t i n g 檢測不同濃度S I N 對人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞相E M T蛋白表達水平的影響。5 W e s t e r nb l o t t i n g 檢測不同濃度S I N 對人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞核內(nèi)N F r , Bp 6 5 蛋白表達水平的影響。結(jié)果:1 采用不同濃度
5、的S I N 處理人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞,檢測結(jié)果表明:處理2 4 h 后,1m m o l /L 、2m m o l /L 、2 .5m m o l /L 和3 m m o l /L 處理組的細胞存活率顯著低于對照組( P < O .0 5 ) 。處理4 8h 后,O .5m m o l /L 、1m m o l /L 、2m m o l /L 、2 .5m m o l /L 以及3m m o l /L 處理組
6、的細胞存活率顯著低于對照組( P < 0 .0 5 ) ,且對青藤堿具有時間和劑量依賴性。2S I N 處理后,可降低人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞培養(yǎng)基I V [ 1 V [ P s 的含量。各S I N 處理組培養(yǎng)基中M M P .2 含量顯著低于對照組( P < O .0 5 ) ,1m m o l /L和2 m m o l /L 處理組的M M P .9 含量降低( P < O .0 5 ) 。3R
7、T —P C R 和W e s t e r nB l o t t i n g 結(jié)果表明:隨S I N 濃度升高,各處理組人胃癌S G C .7 9 0 1 細胞中M M P .2 m R N A 、蛋白表達以及M M P .9 m R N A表達豐度均顯著降低( 尸< O .0 5 ) 。其中0 .5 m m o l /L 、1m m o l /L 和2 m m o l /L三個處理組M M P .9 蛋白表達也顯著降低( 尸&l
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