吳茱萸堿對胃癌SGC-7901細胞生長抑制及凋亡誘導(dǎo)作用的研究.pdf

1、目的：研究吳茱萸堿對胃癌 SGC-7901細胞增殖和凋亡的影響，并探討相關(guān)的作用機制，從而為吳茱萸堿的抗癌作用提供進一步的實驗依據(jù)，為其開發(fā)成為臨床癌癥治療中的一種新型藥物提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細胞，1.5μmol/l吳茱萸堿作用于SGC-7901細胞12h、24h、36h、48h后：①倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)的變化。②PI單染流式細胞術(shù)檢測細胞周期分布情況。③Annexin V-F

2、ITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況。④采用 caspase活性測定試劑盒檢測細胞中caspase3、caspase8和caspase9的活性。⑤Western Blot檢測細胞中 caspase3、caspase8、caspase9、Bax、Bcl-2的表達情況。
　　結(jié)果：①倒置顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察，經(jīng)吳茱萸堿作用的胃癌SGC-7901細胞表現(xiàn)出典型的細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征。②PI單染結(jié)果顯示，吳茱萸堿影響了胃癌SGC-

3、7901細胞周期分布，使細胞周期阻滯于G2/M期。③Annexin V-FITC/PI雙染結(jié)果顯示，吳茱萸堿誘導(dǎo)了胃癌SGC-7901細胞凋亡。④比色法檢測caspase活性結(jié)果顯示，吳茱萸堿作用24h、36h后，胃癌 SGC-7901細胞中 caspase3、caspase8和caspase9的活性均增高。⑤Western Blot檢測結(jié)果顯示，吳茱萸堿作用24h、36h，胃癌SGC-7901細胞中caspase3、 caspase8

4、、caspase9和bax的表達量均增加。吳茱萸堿作用12h、24h時，bcl-2的表達量增加；吳茱萸堿作用36h、48h時，bcl-2的表達量降低。
　　結(jié)論：吳茱萸堿通過使細胞周期阻滯于 G2/M期抑制了胃癌 SGC-7901細胞的增殖，同時當(dāng)吳茱萸堿作用一定時間后，可引起caspase3、caspase8和caspase9活性的增強，增加caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表達，增加bax的蛋白表達，降