Smac基因調(diào)控胃癌細(xì)胞SGC-7901化療敏感性影響的研究.pdf

1、目的： 細(xì)胞凋亡異常是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的關(guān)鍵因素之一。Smac(secondmitochondria-derived activator of caspase)是新近發(fā)現(xiàn)位于線粒體上的一種凋亡調(diào)節(jié)基因，細(xì)胞凋亡時(shí)釋放入細(xì)胞漿中。它通過抑制IAP而激活caspase，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，在介導(dǎo)化療藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡中起重要作用。本研究旨在探討Smac基因在胃癌細(xì)胞SGC-7901的表達(dá)及其過表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞株化療敏感性的影響。

2、 研究對(duì)象： 人胃癌細(xì)胞SGC-7901。 方法： 采用脂質(zhì)體lipofectamine2000介導(dǎo)的方法，將Smac基因轉(zhuǎn)入胃癌細(xì)胞SGC-7901，RT-PCR和Western-blot法檢測癌細(xì)胞中Smac基因的表達(dá)。選用不同濃度紫杉醇(1、5、10μg/ml)處理轉(zhuǎn)染前后的胃癌細(xì)胞，四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞增殖活性，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化并攝影。 結(jié)果： 1同未轉(zhuǎn)染組及

3、空載體組比較，轉(zhuǎn)染外源性Smac基因后SGC-7901細(xì)胞mRNA和蛋白水平顯著增高(P<0.01)。 2各濃度紫杉醇作用24h及48h后，Smac轉(zhuǎn)染組細(xì)胞與未轉(zhuǎn)染組相比其生長抑制率明顯增加(p<0.01)，細(xì)胞體積縮小、形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞皺縮、圓形細(xì)胞比例增多，折光增強(qiáng)、漂浮細(xì)胞增多。各濃度紫杉醇對(duì)未轉(zhuǎn)染對(duì)照組、空載體轉(zhuǎn)染組細(xì)胞生長抑制率間的差異無顯著性(p>0.05)。 結(jié)論： 1 Smac基因在胃癌細(xì)胞SG