高溫調(diào)節(jié)耐藥胃癌細(xì)胞化療敏感性的分子機(jī)制.pdf

1、多藥耐藥是造成腫瘤化療失敗的主要原因，研究多藥耐藥的機(jī)制和逆轉(zhuǎn)方法就成為亟待解決的問(wèn)題。國(guó)內(nèi)外的研究表明腫瘤多藥耐藥存在多種機(jī)制，如藥物外排增加、藥物在細(xì)胞內(nèi)的重新分布、凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑改變、細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境改變等，并涉及到多個(gè)耐藥相關(guān)分子，包括P-gp、MRP、GST、LRP、TOPO-Ⅱ等。現(xiàn)在比較公認(rèn)的兩種多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米和環(huán)孢菌素A，由于毒副作用大，限制了在臨床的應(yīng)用。腫瘤熱療在近十幾年發(fā)展迅速，是一種無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)技術(shù)，在臨床上

2、發(fā)現(xiàn)與放、化療有增敏作用，十分有必要進(jìn)一步探討其與多藥耐藥性的關(guān)系。 目的：觀察43℃高溫對(duì)人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞多藥耐藥的影響，高溫對(duì)加用化療藥物ADM、CDDP、5-FU、TAX時(shí)逆轉(zhuǎn)SGC7901/ADM細(xì)胞多藥耐藥的分子機(jī)制。 材料和方法：選用人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/ADM和對(duì)照的人胃癌敏感細(xì)胞SGC7901株。采用MTT試驗(yàn)、RT-PCR法、Westernblot法、免疫細(xì)胞化學(xué)染色、R

3、ho123外排試驗(yàn)、TUNEL法、PI染色流式細(xì)胞技術(shù)，檢測(cè)在不同溫度和不同藥物作用下，人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞和對(duì)照的人胃癌敏感SGC7901株細(xì)胞的體外藥物敏感性，多藥耐藥相關(guān)基因MDR1、P-gp、MRP、LRP在mRNA水平和蛋白水平上的表達(dá)，P-gp的外排功能及對(duì)腫瘤細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞除了對(duì)誘導(dǎo)耐藥的ADM耐受，對(duì)CDDP、5-FU、TAX也有

4、交叉耐藥。高溫43℃可降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞的生存率，部分逆轉(zhuǎn)細(xì)胞耐藥。在人胃癌敏感株SGC7901細(xì)胞中未檢出MDR1、PGP、MRP、LRP基因的mRNA，在人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞中檢出MDR1、P-gp、MRP的mRNA，未檢出LRP的mRNA。高溫43℃可降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞及在此溫度下合并ADM、CDDP、5-FU、TAX時(shí)MDR1、P-gp的的mRNA表達(dá)量(P＜0.

5、05)，但43℃對(duì)MRP的mRNA表達(dá)的降低差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。高溫43℃還可降低ADM、CDDP、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞時(shí)細(xì)胞對(duì)Rho-123的外排功能。高溫43℃能提高ADM、CDDP、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞時(shí)的細(xì)胞凋亡率。 結(jié)論：1.高溫43℃能增加人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/ADM對(duì)化療藥物ADM、CDDP、5-FU、TAX的敏感性。2.在人胃癌敏感細(xì)胞株

6、SGC7901未檢出耐藥分子。在人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞中與耐藥有關(guān)的主要是MDR1、P-gp，其次是MRP，未見(jiàn)LRP的表達(dá)。3.高溫43℃合并ADM、CDDP、5-FU、TAX時(shí)，降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞的多藥耐藥性主要是通過(guò)MDR1，而非MRP和LRP。4.高溫43℃還可降低ADM、CDDP、5-FU、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細(xì)胞時(shí)細(xì)胞對(duì)Rho123的外排功能。5.高熱43℃促進(jìn)