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文檔簡介
1、多藥耐藥是造成腫瘤化療失敗的主要原因,研究多藥耐藥的機制和逆轉(zhuǎn)方法就成為亟待解決的問題。國內(nèi)外的研究表明腫瘤多藥耐藥存在多種機制,如藥物外排增加、藥物在細胞內(nèi)的重新分布、凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑改變、細胞內(nèi)外環(huán)境改變等,并涉及到多個耐藥相關(guān)分子,包括P-gp、MRP、GST、LRP、TOPO-Ⅱ等。現(xiàn)在比較公認的兩種多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米和環(huán)孢菌素A,由于毒副作用大,限制了在臨床的應(yīng)用。腫瘤熱療在近十幾年發(fā)展迅速,是一種無創(chuàng)或微創(chuàng)技術(shù),在臨床上
2、發(fā)現(xiàn)與放、化療有增敏作用,十分有必要進一步探討其與多藥耐藥性的關(guān)系。 目的:觀察43℃高溫對人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞多藥耐藥的影響,高溫對加用化療藥物ADM、CDDP、5-FU、TAX時逆轉(zhuǎn)SGC7901/ADM細胞多藥耐藥的分子機制。 材料和方法:選用人胃癌耐藥細胞株SGC7901/ADM和對照的人胃癌敏感細胞SGC7901株。采用MTT試驗、RT-PCR法、Westernblot法、免疫細胞化學(xué)染色、R
3、ho123外排試驗、TUNEL法、PI染色流式細胞技術(shù),檢測在不同溫度和不同藥物作用下,人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞和對照的人胃癌敏感SGC7901株細胞的體外藥物敏感性,多藥耐藥相關(guān)基因MDR1、P-gp、MRP、LRP在mRNA水平和蛋白水平上的表達,P-gp的外排功能及對腫瘤細胞周期和細胞凋亡的影響。 結(jié)果:實驗發(fā)現(xiàn)人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞除了對誘導(dǎo)耐藥的ADM耐受,對CDDP、5-FU、TAX也有
4、交叉耐藥。高溫43℃可降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞的生存率,部分逆轉(zhuǎn)細胞耐藥。在人胃癌敏感株SGC7901細胞中未檢出MDR1、PGP、MRP、LRP基因的mRNA,在人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞中檢出MDR1、P-gp、MRP的mRNA,未檢出LRP的mRNA。高溫43℃可降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞及在此溫度下合并ADM、CDDP、5-FU、TAX時MDR1、P-gp的的mRNA表達量(P<0.
5、05),但43℃對MRP的mRNA表達的降低差異無顯著性(P>0.05)。高溫43℃還可降低ADM、CDDP、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞時細胞對Rho-123的外排功能。高溫43℃能提高ADM、CDDP、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞時的細胞凋亡率。 結(jié)論:1.高溫43℃能增加人胃癌耐藥細胞株SGC7901/ADM對化療藥物ADM、CDDP、5-FU、TAX的敏感性。2.在人胃癌敏感細胞株
6、SGC7901未檢出耐藥分子。在人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞中與耐藥有關(guān)的主要是MDR1、P-gp,其次是MRP,未見LRP的表達。3.高溫43℃合并ADM、CDDP、5-FU、TAX時,降低人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞的多藥耐藥性主要是通過MDR1,而非MRP和LRP。4.高溫43℃還可降低ADM、CDDP、5-FU、TAX作用人胃癌耐藥株SGC7901/ADM細胞時細胞對Rho123的外排功能。5.高熱43℃促進
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