Raf激酶抑制蛋白增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞的化療敏感性的研究.pdf

1、目的:研究Raf激酶抑制蛋白對(duì)宮頸癌細(xì)胞化療敏感性的影響。
　　方法:以脂質(zhì)體法將含有人全長(zhǎng)RKIP基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-ssRKIP轉(zhuǎn)染入宮頸癌Hela細(xì)胞中，用G418篩選出含目的基因的穩(wěn)定細(xì)胞系，Westernblotting法檢測(cè)Hela細(xì)胞中RKIP蛋白的表達(dá)。不同濃度順鉑作用不同時(shí)間，MTT法觀察RKIP轉(zhuǎn)染對(duì)順鉑作用于Hela細(xì)胞體外增值的影響，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)RKIP基因轉(zhuǎn)染對(duì)順鉑誘導(dǎo)Hela細(xì)胞

2、凋亡的影響。
　　結(jié)果:pcDNA3.1(+)-ssRKIP轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞RKIP蛋白表達(dá)明顯升高。不同濃度的順鉑分別處理各組細(xì)胞24、48、72 h后，RKIP基因轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞增殖抑制率顯著高于對(duì)照組細(xì)胞(P＜0.05)。以5μ g/ml順鉑作用Hela細(xì)胞24 h后，RKIP轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的凋亡率為(23.2±0.24)％，明顯高于未轉(zhuǎn)染組的(12.4±0.31)％和轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的(13.4±0.47)％(P＜0.05)