穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向bcl-2的shRNA對胃癌SGC-7901細(xì)胞株5-FU-DDP敏感性的影響.pdf

1、目的：探討穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向bc1-2的小發(fā)夾RNA對胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖、凋亡及化療敏感性的影響。
　　 方法：構(gòu)建針對bc1-2的小發(fā)夾RNA質(zhì)粒表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入SGC-7901細(xì)胞，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞克隆繼續(xù)壓力培養(yǎng)。不同濃度的5-Fu或DDP作用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染靶向Bc1-2shRNA的胃癌SGC-7901細(xì)胞。RT-PCR法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后SGC-7901細(xì)胞bc1-2mRNA的表達(dá)，MTT檢測細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋

2、亡。
　　 結(jié)果：穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shRNA后，SGC-7901細(xì)胞的bc1-2mRNA表達(dá)明顯下降；細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞凋亡率無明顯變化。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組5-Fu的IC5。為14.36±1.63mg/L，未轉(zhuǎn)染對照組為35.62±1.95mg/L(p＜0.05)；穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組DDP的IC5。為2.53±0.46mg/L，未轉(zhuǎn)染對照組為6.89±0.52mg/L(p＜0.05)，流式細(xì)胞術(shù)顯示穩(wěn)定轉(zhuǎn)染組凋亡率明顯增高(p＜0.05)。