胃腺癌Akt1基因表達(dá)及其在人胃癌細(xì)胞系SGC7901中調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文胃腺癌Akt1基因表達(dá)及其在人胃癌細(xì)胞系SGC7901中調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：崔小偉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)消化系病指導(dǎo)教師：張慶瑜20090501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文期分布發(fā)現(xiàn)S期細(xì)胞比例降低，細(xì)胞阻滯于G0／G1期，MTT結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染AktlsiRNA組細(xì)胞的增殖率明顯受到抑制(P005)，matrigel實(shí)驗(yàn)及transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果均提示，轉(zhuǎn)染AktlsiRNA組細(xì)胞的侵襲能力受到了抑制，

2、劃痕實(shí)驗(yàn)顯示細(xì)胞的遷移能力降低。第三部分：成功建立SGC7901胃癌細(xì)胞系裸鼠皮下腫瘤后，每4天測量一次腫瘤體積，并在腫瘤局部多點(diǎn)注射siRNA和oligofectamine混合物，發(fā)現(xiàn)和control組相比，AktlsiRNA治療組腫瘤的生長緩慢，應(yīng)用免疫組化法檢測腫瘤標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)Aktl蛋白表達(dá)降低的同時(shí)，此通路上相關(guān)基因的表達(dá)也下降，應(yīng)用TUNEL法檢測原位細(xì)胞凋亡發(fā)現(xiàn)，AktlsiRNA治療組凋亡的細(xì)胞明顯增多，體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)

3、果一致。結(jié)論：1胃癌中Aktl異常激活，且Akt通路上的相關(guān)基因表達(dá)增加，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲，阻滯了細(xì)胞的凋亡。2應(yīng)用RNA干涉技術(shù)以oligofectamine介導(dǎo)轉(zhuǎn)染靶向Aktl的siRNA可有效敲低目的基因在人胃癌細(xì)胞系SGC7901內(nèi)的表達(dá)，同時(shí)抑帶UAkt通路的活性，從而抑制了細(xì)胞的增殖和侵襲，出現(xiàn)G0／G1期阻滯，并誘發(fā)細(xì)胞凋亡。3裸鼠皮下胃癌動(dòng)物模型應(yīng)用oligofectamine介導(dǎo)AktlsiRNA治療，同樣