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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文CD44反義寡核苷酸抑制胃癌細(xì)胞SGC7901粘附侵襲的實驗研究姓名:崔越宏申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:徐惠綿20020501Biotin標(biāo)記的CD44反義寡核苷酸(asODN)配合組織細(xì)胞化學(xué)方法觀察轉(zhuǎn)染后其在細(xì)胞內(nèi)的分布,并用免疫組化的方法檢測是否有蛋白表達(dá)的變化,然后用脂質(zhì)體將CD44asODN轉(zhuǎn)染SGC7901胃癌細(xì)胞系,通過lit—PCR、流式細(xì)胞術(shù)、MTY法、聚碳酸酯膜侵襲試驗分別測定CD
2、44mRNA和細(xì)胞表面CD44蛋白表達(dá)及癌細(xì)胞粘附力、侵襲力的變化,透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu),統(tǒng)計分析采用SPSSl00軟件行配對計量資料t檢驗。結(jié)果1生物素標(biāo)記的CD44asODN轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞3小時,未見胞漿及胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯變化,6小時才見細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)淺棕色顆粒;2從免疫組化的結(jié)果可以看出轉(zhuǎn)染36小時后細(xì)胞C13嗎4蛋白表達(dá)有所下降;3RT—PCR結(jié)果顯示asODN組CD44/fl—actinmRNA相對定量比值(0641tO08
3、4)較對照組(08940120)顯著降低(PO05);4流式細(xì)胞術(shù)檢測asODN組平均熒光指數(shù)為(20870577)較對照組(52831783)明顯下降(P005);5粘附實驗表明asODN組粘附力(01590025)較對照組(o2940058)顯著下降(P001);6asODN組穿透聚碳酸酯膜的細(xì)胞數(shù)(751291)較對照組(15751708)亦有顯著降低(P001);7透射電鏡觀察表明經(jīng)asODN作用后,癌細(xì)胞表面?zhèn)巫愫颓驙钔黄鹈黠@
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