RNA干擾對(duì)5637膀胱癌細(xì)胞survivin基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的：研究干擾RNA(RNAi)對(duì)5637細(xì)胞survivin基因表達(dá)的干擾效應(yīng)。 方法：化學(xué)合成survivin序列特異性雙鏈RNA(dsRNA)，用Lipofectamrne2000轉(zhuǎn)染5637細(xì)胞，采用定量PCR檢測(cè)survivin基因的表達(dá)，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Annexinv標(biāo)記的凋亡細(xì)胞。 結(jié)果：序列特異性dsRNA-survivin可顯著抑制suvivin基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)，與陰性對(duì)照組相比，在濃度為40n

2、mol／L的dsRNA-survivin轉(zhuǎn)染5637細(xì)胞24，48小時(shí)后survivinmRNA表達(dá)的抑制率分別為29％和53％，在濃度為100nmol／L的dsRNA-survivin轉(zhuǎn)染5637細(xì)胞24，48小時(shí)后survivinmRNA表達(dá)的抑制率分別為46％和86％，suvivin基因表達(dá)的抑制與5637細(xì)胞的凋亡相關(guān)聯(lián)。 結(jié)論：SUrVivin的siRNA在膀胱癌5637細(xì)胞中有較高的轉(zhuǎn)染效率：當(dāng)survivin的si

3、RNA濃度為100nmol／L，轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，干擾效率高達(dá)86％，并且5637細(xì)胞凋亡明顯增多，survivinmRNA表達(dá)明顯下調(diào)，可望成為膀胱癌基因治療的新途徑。 雙鏈RNA(DsRNA)誘導(dǎo)與之同源的mRNA降解，從而導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄后基因沉默(post-transcriptionalgenesilencing,PTGS)的現(xiàn)象或機(jī)制稱為RNA干擾(RNAinterference,RNAi)，在過(guò)去的幾年里，這一領(lǐng)域的研究發(fā)生了