粉防己堿對肺癌細胞株A549的放射敏感性影響及相關機制探討.pdf

1、目的：探討粉防己堿配合X線在體外環(huán)境中對肺癌細胞株A549生長、集落形成、細胞周期及相關蛋白表達的影響。
　　方法：本實驗以人肺癌細胞株A549為研究對象，以粉防己堿和X射線為處理因素，采用MTT比色實驗觀察Tet對A549細胞的增殖抑制效應；利用克隆形成實驗觀察Tet對A549細胞的放射敏感性的影響；細胞流式術檢測A549細胞在各種因素處理后細胞周期的分布情況；蛋白印跡試驗分析處理因素對細胞周期相關蛋白表達的影響。
　　結(jié)

2、果：MTT比色法顯示高劑量的Tet對肺癌A549細胞的有明顯的抑制作用，低劑量(0.5～3.4μg/ml)的Tet對A549細胞抑制率＜10％，可以作為放射增敏的劑量參考；克隆形成實驗顯示，1μg/ml的Tet配合X射線可以明顯降低A549細胞的克隆形成率，放射增敏比（SER）為1.46；細胞流式術發(fā)現(xiàn)，X射線可以引起 A549細胞 G2期阻滯，而低劑量（1μg/ml）的Tet可以減少 G2期阻滯，高劑量（10μg/ml）則增加這種阻滯

3、；Western blotting實驗顯示，在接受4Gy的X射線照射后，A549細胞CyclinB1蛋白表達水平降低，磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達增高，在加用小劑量Tet后CyclinB1蛋白表達水平增高，磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達降低，大劑量（10μg/ml）則相反。
　　結(jié)論：1.粉防已堿可抑制人肺癌細胞株A549的生長，其抑制效應具有劑量依賴性和時間依賴性。2.小劑量的粉防己堿可增加X射線對人肺癌細胞株