白花丹素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞放射敏感性的影響.pdf

1、目的:
　　擬通過實(shí)驗(yàn)證明白花丹素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的抑制作用和體外放射增敏作用,并探討其機(jī)制,為非小細(xì)胞肺癌的治療提供新的思路和途徑。
　　方法:
　　1、光學(xué)倒置顯微鏡下觀察白花丹素處理非小細(xì)胞肺癌 A549細(xì)胞后的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。
　　2、四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)不同濃度白花丹素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的抑制效應(yīng)。
　　3、X線照射非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞,克隆形成法計(jì)算細(xì)胞存活率

2、,“單靶多擊”數(shù)學(xué)模型擬合細(xì)胞存活曲線,檢測(cè)白花丹素對(duì)非小細(xì)胞肺癌 A549細(xì)胞作用24小時(shí)的放射增敏比(SER)的影響。
　　4、流式細(xì)胞法檢測(cè)不同處理組(對(duì)照組、白花丹素組、放射組、白花丹素聯(lián)合放射組)對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的凋亡的影響。
　　5、Western Blot方法檢測(cè)各組射線干預(yù)前后Bcl-2表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1、光學(xué)倒置顯微鏡觀察結(jié)果顯示:白花丹素在體外可以抑制非小細(xì)胞肺癌A

3、549細(xì)胞的增殖。
　　2、MTT比色法檢測(cè)結(jié)果顯示:白花丹素對(duì)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞有抑制增殖作用,與藥物濃度呈正相關(guān),其24小時(shí)IC10為1.38μmol/L。
　　3、克隆形成結(jié)果顯示:細(xì)胞存活曲線顯示白花丹素聯(lián)合放射組比單純放射組的D0、Dq值均變小:D0值從對(duì)照組的1.29Gy,降至聯(lián)合放射組的1.05Gy;Dq值從對(duì)照組的1.72Gy,降至聯(lián)合放射組的1.48Gy。白花丹素作用24h后的放射增敏比為1.228。

4、
　　4、流式細(xì)胞法檢測(cè)結(jié)果顯示:白花丹素聯(lián)合放射組的細(xì)胞凋亡率明顯升高。
　　5、Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示:與單純放射組相比,白花丹素聯(lián)合放射組A549細(xì)胞核中Bcl-2蛋白表達(dá)明顯降低。
　　結(jié)論:
　　1、白花丹素對(duì)A549細(xì)胞有增殖抑制作用,與藥物濃度呈正相關(guān)。
　　2、白花丹素對(duì)A549細(xì)胞有一定的放射增敏作用。
　　3、白花丹素對(duì)A549細(xì)胞的放射增敏作用機(jī)制,可能是通過下調(diào)B