蚯蚓纖溶酶增加人食管癌細胞、胃癌細胞對放射線敏感性的實驗研究.pdf

1、目的:探討蚯蚓纖溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme，EFE)對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803的放射增敏作用及機制。 方法： (1)MTT法觀察EFE作用24小時(設立6個濃度組：0uku/ml、0.4uku/ml、1.0uku/ml、2.0uku/ml、4.0uku/ml、6.0uku/ml)，對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803的生長抑制作用。 (2

2、)克隆形成實驗觀察EFE的放射增敏作用(設立對照組、0.1uku/mlEFE組、0.3uku/m EFE組)，分組處理、照射后，分別觀察EFE對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803細胞克隆形成率的影響。 (3)流式細胞術觀察EFE對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803細胞周期分布的影響(設立對照組、EFE組、射線組、EFE+射線組)。 (4)RT-PCR法檢測EFE對食管癌細胞株ECA109、胃癌

3、細胞株MGC803內硒谷胱甘肽過氧化物酶基因表達的影響(設立對照組、EFE組、射線組、EFE+射線組)。 結果: (1)MTT結果提示，EFE對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803有生長抑制作用，抑制率隨EFE濃度增長而上升。EFE對食管癌細胞株ECA109的半數抑制濃度(IC<,50>)為3.8uku/ml； MGC803細胞株的半數抑制濃度(IC<,50>)為2.5 uku/ml。 (2)克隆形成

4、實驗結果提示，0.1uku/ml、0.3uku/ml的EFE對食管癌細胞株ECA109有放射增敏效應，放射增敏比分別為1.37和1.59。0.1uku/ml、0.3uku/ml的EFE對胃癌細胞株MGC803的放射增敏比分別為1.06和1.14。 (3)流式細胞術結果提示，射線照射誘發(fā)食管癌細胞株ECA109出現G<,2>期阻滯；EFE與射線聯(lián)合作用時，細胞G<,2>/M期比例下降更顯著。射線照射誘發(fā)胃癌細胞株MGC803出現G

5、<,1>期阻滯，而EFE單獨或與射線聯(lián)合作用，對細胞的G<,1>期阻滯均無明顯影響。 (4)RT-PCR檢測結果提示，射線可誘導食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803胞內的SeGPx mRNA表達下調，而EFE能夠增強兩種細胞內射線誘導的SeGPx mRNA表達下調作用。 結論: EFE對食管癌細胞株ECA109、胃癌細胞株MGC803有生長抑制作用；EFE能夠增加食管癌細胞ECA109、胃癌細胞株MG