蚯蚓纖溶酶抑制胃癌細胞粘附及誘導凋亡的研究.pdf

1、目的：研究蚯蚓纖溶酶對胃癌細胞與血管內(nèi)皮細胞粘附性及粘附分子CD44v6表達的影響，初步探討蚯蚓纖溶酶是否具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。同時觀察蚯蚓纖溶酶有無抑制胃癌細胞增殖及誘導凋亡的作用。 方法：(1)采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色分析法觀察蚯蚓纖溶酶對人胃癌細胞株MGCS03增殖的影響。(2)蚯蚓纖溶酶各實驗組作用于胃癌細胞48小時后，采用體外粘附實驗觀察蚯蚓纖溶酶對胃癌細胞與血管內(nèi)皮細胞粘附性的影響，流式細胞術(shù)和免疫細胞化學染

2、色法觀察蚯蚓纖溶酶作用于MGC803細胞后CD44v6蛋白表達的變化，采用RT-PCR方法檢測藥：物作用細胞后CD44v6 mRNA表達水平的變化。(3)蚯蚓纖溶酶各實驗組作用于MGC803細胞48小時后，DNA凝膠電泳技術(shù)觀察凋亡細胞變化，流式細胞術(shù)觀察細胞凋亡率的變化，免疫細胞化學染色法觀察蚯蚓纖溶酶對p53蛋白表達的影響。 結(jié)果：(1)蚯蚓纖溶酶各用藥組(濃度分別為1、2、4、6、8 uku/ml)對MGC803細胞均有抑

3、制生長作用(P<0.01)，且在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴關(guān)系。(2)蚯蚓纖溶酶各實驗組作用于MGC803細胞48小時后，與對照組相比，胃癌細胞與血管內(nèi)皮細胞粘附性下降(P<0.01)。流式細胞術(shù)及免疫細胞化學染色法觀察到CD44v6蛋白表達水平下降(P<0.01)，RT-PCR結(jié)果顯示各實驗組CD44v6 mRNA表達水平下降(P<0.01)，并呈劑量依賴性。(3)蚯蚓纖溶酶作用于胃癌細胞48小時后，DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察到典型梯狀條