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文檔簡(jiǎn)介
1、蚯蚓纖溶酶(Earthworm Fibrinolytic Enzymes,簡(jiǎn)稱EFE)是一組存在于蚯蚓體內(nèi)的絲氨酸蛋白水解酶,具有纖維蛋白溶解活性或纖溶酶原激活活性,既能溶解陳舊血栓又能抑制新血栓形成,可以口服,目前已廣泛用于臨床。本研究選擇具有纖溶酶最高活性的EFE7#組分編碼基因?yàn)橥庠茨康幕颍M(jìn)行櫻桃番茄遺傳轉(zhuǎn)化,對(duì)其在櫻桃番茄組織中的表達(dá)進(jìn)行初步的研究,為進(jìn)一步探索和開(kāi)發(fā)含有預(yù)防和治療血栓疾病的基因工程食品奠定基礎(chǔ)。
2、 本研究將本實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建好的含EFE基因的番茄組成型表達(dá)載體pF和番茄成熟果實(shí)特異性表達(dá)載體pEF通過(guò)三親交配法轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌EHA105中;在建立起的高效番茄農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系基礎(chǔ)上,進(jìn)行目的基因轉(zhuǎn)入番茄植株的研究,獲得了再生植株,并對(duì)其進(jìn)行了分子鑒定。
結(jié)果表明,質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌方法-三親交配法效率較高。確定了適合番茄組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方,確定合適的農(nóng)桿菌浸染濃度是OD600值為0.3,浸染時(shí)間為10min。建立起一套高效
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