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1、以大豆胰蛋白酶抑制劑SBTI為配基,Sepharose-4B為載體的親和層析從赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)勻漿液中分離出了蚯蚓纖溶酶全組分,采用DEAE-Cellulose-52離子交換柱層析和制備電泳分離純化了蚯蚓纖溶酶單組分EfP-Ⅰ-1和EfP-Ⅰ-2。纖維蛋白平板法和BAEE測(cè)得組分EfP-Ⅰ-1的比活力分別為0.30IU/μg和3.79U/μg,組分EfP-Ⅰ-2的比活力分別為0.41IU/μg和6.13U/μ
2、g。
Schiffs試劑染色證明蚯蚓纖溶酶為一組糖蛋白組分,全組分的含糖量為2.98%,單組分EfP-Ⅰ-1和EfP-Ⅰ-2含糖量分別為5.71%和1.93%。三種凝集素ConA,LCA,AAL點(diǎn)印跡結(jié)果表明,EfP-Ⅰ-1和EfP-Ⅰ-2都具有末端甘露糖殘基和核心巖藻糖結(jié)構(gòu)的糖形。
分別以三氟甲基磺酸去糖基化前后的蚯蚓纖溶酶全組分EFEs為抗原免疫家兔,Western-blotting和ELISA結(jié)果表明,
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