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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文N糖基化對(duì)曲霉植酸酶酶學(xué)性質(zhì)的影響姓名:史曉委申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:王曉云20090531N一糖基化對(duì)曲霉植酸酶酶學(xué)性質(zhì)的影響3酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究發(fā)現(xiàn),突變植酸酶A328T與底物的親和力提高,其‰與野生型相比降低了大約26%,‰。t與‰。。/‰大幅提高,表明在此處將蘇氨酸替換為丙氨酸,大大提高了酶對(duì)底物的專一性,同時(shí)也提高了酶的催化效率,可能是引入糖基化位點(diǎn)后,影響了其前后緊鄰的兩
2、個(gè)糖基化位點(diǎn)的糖基化,使得酶與底物結(jié)合的更加緊密。4熱穩(wěn)定性分析表明,突變植酸酶A328T的熱穩(wěn)定性比野生型有顯著提高,85℃下15rain的剩余活力比野生型提高30%左右,而突變酶A328T的熱穩(wěn)定性與野生型差別不大。兩種突變酶都是額外引入糖基化位點(diǎn),前人研究發(fā)現(xiàn)NA—T結(jié)構(gòu)(A328T)比NAS結(jié)構(gòu)(A328S)更容易糖基化,這也許是兩突變酶熱穩(wěn)定性差別的原因。突變酶N326D和N326S/A328T的熱穩(wěn)定性比野生型稍有降低,與所
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