CpG ODNs增加人鼻咽癌CNE-2細胞對X、β射線放射敏感性的實驗研究.pdf

1、目的：鼻咽癌是我國常見的惡性腫瘤之一，95％以上屬于低分化癌和未分化癌類型，惡性程度高、生長快，容易出現(xiàn)淋巴結(jié)或血道轉(zhuǎn)移。目前放射治療是治療鼻咽癌的主要手段⑴。鼻咽癌病人早期(Ⅰ，Ⅱ期)的5年生存率達76％～90％，但中晚期(Ⅲ，Ⅳ期)鼻咽癌單純放射治療的5年生存率多年來一直徘徊中20％～50％左右。大部分患者來就診時已是中晚期，治療上采用放射治療為主、化療為輔的方式。雖然近期治療效果有一定提高，但對總生存率未見明顯提高，重要原因之一是

2、鼻咽癌細胞對射線產(chǎn)生了的不同程度的耐受。 20世紀(jì)60年代，英國科學(xué)家Adams提出了著名的親電子理論，開始對放射增敏劑進行研究。至今為止放射增敏劑在國內(nèi)外研究引人注目，放射治療增敏劑的應(yīng)用己經(jīng)成為腫瘤治療的一部分，并已建立起一整體的篩選方法。雖然國內(nèi)外對一些增敏效應(yīng)明顯的化學(xué)物質(zhì)進行了大量的研究，但目前在國際上仍未找到被公認(rèn)的低毒有效的放療增敏劑。 本研究以我室前期設(shè)計的CpGODNs為研究對象，篩選對CNE-2細胞具

3、有放射增敏作用的CpGODN，并對CpGODN的增敏作用機制進行初步研究，為尋找高效、低毒的放射增敏藥物奠定實驗基礎(chǔ)。 方法：應(yīng)用不同序列的CpGODNs處理人鼻咽癌細胞系CNE-2，然后分別經(jīng)X、B射線照射，①采用MTT法檢測細胞的增殖情況；②采用體外培養(yǎng)集落形成率觀察細胞的集落形成，③采用細胞劃痕法觀察細胞遷移能力，④采用流式細胞術(shù)檢測細胞周期和凋亡情況，以明確CpGODN的放射增敏作用及其可能機制。 結(jié)果：①CpG

4、ODN104、106可顯著增加CNE-2經(jīng)X射線照射后的放射敏感性，CpGODN109、201、211可增加CNE-2經(jīng)X射線照射后的放射敏感性；②CpGODN106可抑制CNE-2細胞增殖，并呈一定量效關(guān)系；CpGODN106聯(lián)合X射線可增強抑制對CNE-2細胞的增殖作用，其中以30μg/mlCpGODN106的作用最強；③CpGODN106(30μg/ml)能抑制CNE-2細胞增殖和遷移；CpGODN106在聯(lián)合X射線照射后細胞周期

5、被阻止在G0/G1期，細胞凋亡顯著增加；④CpGODN101-109、201、208、210、211可增加CNE-2經(jīng)β射線照射后的放射敏感性；⑤CpGODN107(30μg/ml)能抑制CNE-2細胞增殖和遷移；CpGODN106在聯(lián)合β射線照射后細胞周期被阻止在G0/G1期，細胞凋亡顯著增加。 結(jié)論：CpGODN106、CpGODN107對CNE-2細胞有明顯的放射增敏作用，該作用與其將CNE-2細胞阻止在G0/G1期、誘導(dǎo)