硫化氫對血管加壓素介導(dǎo)大鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的：
　　通過觀察硫化氫對血管加壓素(arginine vasopressin，AVP)誘導(dǎo)大鼠的心臟成纖維細(xì)胞(cardiac fibroblasts，CFs)增殖的影響及其與鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(calcineurin，CaN)水平的關(guān)系，探討硫化氫對大鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖的影響及其可能機(jī)制。
　　方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)和處理：復(fù)蘇、傳代培養(yǎng)；2、細(xì)胞干預(yù)：將大鼠心臟成纖維細(xì)胞分為12孔進(jìn)行培養(yǎng)，每孔含細(xì)胞數(shù)5×103個(gè)，共分成

2、四組：AVP組、NaSH組（即硫化氫組）、AVP+NaSH組及對照組。其中，AVP組共1孔，予以10-7mmol/LAVP處理；NaSH組包括A、B、C、D、E5孔，分別予以10-9，10-8，10-7，10-6，10-5mol/L濃度的硫氫化鈉處理；AVP+NaSH組包括A、B、C、D、E5孔，均予10-7mmol/LAVP處理，同時(shí)分別予以10-9，10-8，10-7，10-6，10-5mol/L濃度的硫氫化鈉處理；對照組1孔，無干

3、預(yù)。各組細(xì)胞培養(yǎng)、干預(yù)72小時(shí)后留取上清液，收集細(xì)胞。3、采用二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽法(MTT)檢測各組大鼠心臟成纖維細(xì)胞的增殖水平4、采用流式細(xì)胞分析儀技術(shù)（FCM）檢測各組心臟成纖維細(xì)胞中DNA合成期（S期）細(xì)胞的百分比5、采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測定各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中CaN濃度。
　　結(jié)果：
　　1、AVP組的CFs吸光度值(1.382±0.012)較對照組(1.058±0.015)明顯增高(P<0.05

4、)；NaHS+AVP組中 A、B、C、D、E孔吸光度值分別為（1.313±0.010）、（1.248±0.014）、（1.229±0.014）、（1.197±0.009）、（1.136±0.009），呈濃度依賴性降低，其中E孔CFs吸光度值最低(均P<0.05)；但是AVP+ NaSH組（A、B、C、D、E）的CFs吸光度值較AVP組明顯降低(均P<0.05)；NaHS組A、B、C、D、E5孔CFs吸光度值分別為（1.070±0.013

5、）、（1.053±0.012）、（0.94±0.011）、（0.912±0.011）、（0.75±0.012），均較對照組低(均P<0.05)。
　　2、AVP組（35.86％）、AVP+NaSH組（E）（24.07%）細(xì)胞中 S期細(xì)胞比例顯著高于對照組（22.51%）（均P<0.05）；但是AVP+ NaSH組（E）較AVP組S期細(xì)胞比例明顯降低（24.07% VS35.86%，P<0.05）；而且NaSH組（E）細(xì)胞中S期細(xì)胞

6、比例低于對照組（18.47% VS22.51%，P<0.05）。
　　3、AVP組(74.214±5.72)pg/mg、AVP+ NaSH組（E）（59.011±3.65）pg/mg上清液CaN水平較對照組(45.773±4.756)pg/mg明顯增高(均P<0.05)；但是AVP+ NaSH組E孔（59.011±3.65）pg/mgCaN濃度較AVP組明顯降低(P<0.05)；而且NaSH組E孔CaN濃度（8.578±2.074