己酮可可堿對(duì)小鼠精子體外獲能、頂體反應(yīng)的影響.pdf

1、本文研究了己酮可可堿(Pentoxifylline，PF)對(duì)昆白小鼠精子獲能和項(xiàng)體反應(yīng)(Acrosome Reaction，AR)的作用。 實(shí)驗(yàn)一：分別以0mg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml的PF和10ug/ml的孕酮(Progesterone，P4)作用精子30分鐘，然后用考馬斯亮藍(lán)(Coomassje brillant blue，CBB)染色法檢測(cè)

2、各組精子的AR率并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。研究上述濃度的PF和P4誘導(dǎo)精子發(fā)生頂體反應(yīng)的作用，分析PF與精子頂體反應(yīng)的量效關(guān)系。結(jié)果表明所有的PF處理組和P4處理組，與對(duì)照組(PF0.0-30)的AR率都沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。 實(shí)驗(yàn)二：用上述濃度梯度的PF作用精子30分鐘，再用10μg/ml P4處理精子10分鐘以誘導(dǎo)獲能精子發(fā)生頂體反應(yīng)。對(duì)各組的AR率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，研究不同濃度的PF對(duì)P4誘導(dǎo)小鼠精子發(fā)生頂體反應(yīng)的作用，分析PF

3、與小鼠精子獲能的量效關(guān)系。結(jié)果顯示0.125mg/ml PF處理組的AR率與對(duì)照組(PF0.0-30：P4-10)的AR率沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，而0.25mg/ml PF處理組的AR率與對(duì)照組有顯著差異(P<0.05)，lmg/ml及以上濃度的PF處理組的AR率與對(duì)照組有極顯著差異(P<0.01)。 實(shí)驗(yàn)三：先使小鼠精子獲能培養(yǎng)60分鐘，再以同上濃度梯度的PF、10 μ g/ml的P4、PF和P4同時(shí)作用小鼠精子10分鐘

4、。統(tǒng)計(jì)分析各組的AR率，研究不同濃度的PF對(duì)獲能精子發(fā)生頂體反應(yīng)的作用，分析PF與已獲能精子發(fā)生頂體反應(yīng)的量效關(guān)系，分析PF與P4對(duì)已獲能精子發(fā)生頂體反應(yīng)是否有協(xié)同作用。結(jié)果顯示0.5mg/ml及以下濃度的PF處理組的AR率與對(duì)照組(PF0.0-10)的AR率沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，lmg/ml及以上濃度的PF處理組的AR率與對(duì)照組有顯著差異(P<0.05)，P4處理組及PF和P4同時(shí)處理組的AR率與對(duì)照組有極顯著差異(P<0.0

5、1)，P4處理組與PF和P4同時(shí)處理組的AR率沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。 實(shí)驗(yàn)四：用能促進(jìn)獲能精子發(fā)生頂體反應(yīng)的最低濃度的PF作用精子，分別檢測(cè)作用0分鐘、20分鐘、40分鐘、60分鐘、80分鐘、100分鐘時(shí)精予的AR率并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，分析PF與小鼠精子AR的時(shí)效關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)PF處理組和對(duì)照組(M16)在0分鐘、20分鐘、40分鐘時(shí)的AR率并沒(méi)有顯著差別(P>0.05)，而在60分鐘以后PF處理組的AR率明顯高于對(duì)照組(P