己酮可可堿對(duì)慢性吸煙小鼠肺免疫病理學(xué)的作用及其可能機(jī)制.pdf

1、肺內(nèi)炎癥細(xì)胞的活化和免疫效應(yīng)細(xì)胞的趨化是導(dǎo)致吸煙肺氣腫形成和發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，同時(shí)一些信號(hào)通路也在其中起著重要的作用。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)，己酮可可堿（PTX）干預(yù)可抑制豚鼠慢性吸煙肺氣腫的發(fā)生，并可能導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)生肺纖維化。Wnt/β-catenin信號(hào)通路是調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和凋亡的關(guān)鍵途徑，該途徑的激活與人特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化-尋常型間質(zhì)性肺炎（IPF/UIP）病變，以及肺纖維化的中心環(huán)節(jié)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過(guò)程密切相關(guān)。PTX對(duì)小

2、鼠是否也有類(lèi)似的抑制吸煙肺氣腫形成和導(dǎo)致肺纖維化的作用，PTX抑制吸煙肺氣腫形成的免疫機(jī)制，以及PTX對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控與其導(dǎo)致吸煙肺纖維化的關(guān)系尚未得到揭示。
　　 目的:探討PTX對(duì)慢性吸煙BALB/c小鼠肺組織病理學(xué)改變的影響及與IFN-g/IL-4因子表達(dá)的關(guān)系；探討PTX對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白（IP-10）介導(dǎo)的CXCR3+Th1和Tc1細(xì)胞向吸煙動(dòng)物肺內(nèi)趨化的影響；探討PTX對(duì)慢性吸煙小鼠肺內(nèi)Wnt

3、/β-catenin信號(hào)通路表達(dá)的影響及與肺纖維化的關(guān)系。
　　 方法:慢性吸煙和PTX干預(yù)BALB/c小鼠，觀察肺組織病理學(xué)改變。ELISA法檢測(cè)慢性吸煙和PTX干預(yù)動(dòng)物肺泡灌洗液IFN-g、IL-4、IP-10表達(dá)和肺組織TGF-b1表達(dá)。ELISA法檢測(cè)PTX對(duì)香煙煙霧提取物刺激體外培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞表達(dá)IP-10的影響。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肺組織CXCR3陽(yáng)性細(xì)胞。免疫組織化學(xué)染色和Western blot法檢測(cè)β-

4、catenin蛋白在動(dòng)物肺組織內(nèi)的表達(dá)。RT-PCR法檢測(cè)TCF-1和LEF-1表達(dá)。Western blot法檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）表達(dá)變化。
　　 結(jié)果: PTX干預(yù)可導(dǎo)致慢性（4月）吸煙BALB/c小鼠發(fā)生肺纖維化，伴有IFN-g/IL-4因子比例逆轉(zhuǎn)。PTX干預(yù)可抑制吸煙（1周）BALB/c小鼠肺內(nèi)IFN-g和IP-10表達(dá)，減少CXCR3+Th1和Tc1細(xì)胞數(shù)量，抑制吸煙對(duì)RAW264.7細(xì)胞表達(dá)IFN-

5、g和IP-10的活化作用。PTX可活化β-catenin蛋白在肺組織的表達(dá)和向胞漿內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)LEF-1基因和TGF-b1表達(dá)，但對(duì)cyclinD1蛋白表達(dá)和TCF-1基因表達(dá)水平無(wú)顯著影響。
　　 結(jié)論: PTX可阻抑慢性吸煙BALB/c小鼠形成肺氣腫，并在部分動(dòng)物導(dǎo)致肺纖維化形成。該作用可能與調(diào)控Th1/Th2細(xì)胞因子平衡、抑制IP-10介導(dǎo)的CXCR3+Th1和Tc1細(xì)胞向肺內(nèi)趨化，以及激活Wnt/β-catenin信號(hào)通