己酮可可堿對內毒素感染大鼠全身炎癥反應和腸道損傷的影響及其分子機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察己酮可可堿(PTX)對內毒素(LPS)感染大鼠全身炎癥反應和腸道損傷的影響,并初步探討其作用的分子機制。 方法:1.選擇雄性Wistar大鼠48只,隨機分為對照組、LPS組(LPS,5mg/kg,iv)、LPS+PTX組(LPS,5mg/kg,iv;PTX,6.25、12.5、25、50、100mg/kg,iv)及PTX對照組(100mg/kg,iv)。靜脈注射LPS建立大鼠內毒素休克模型,分別觀察注射LPS前(0h)

2、、注射后1h、4h、8h、12h的血壓心率,相應時間點抽取動脈血行酸堿和血氣分析,24小時后離斷頸椎處死動物,取小腸組織備用。2.另外選擇96例,分組及實驗同前,在LPS注入1或4h后心臟穿刺采集大鼠血標本,并收集肺、小腸、肝組織,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血漿TNF-α和IL-6、IL-10濃度,髓過氧化物酶法(MPO)檢測組織中中性粒細胞浸潤情況,RT-PCR法測定組織的ICAM-1mRNA。3.應用實驗第一二部分收集的小腸

3、組織,EMSA測定腸組織的核轉錄因子kappaB(NF-κB)的含量;RT-PCR法測定腸組織的TNF-αmRNA和IL-6、IL-10mRNA,ELISA法測定TNF-α和IL-6、IL-10的水平,并將24h小腸組織光鏡下行病理觀察。 結果:1.靜脈注射內毒素可以引發(fā)代謝性酸中毒、低血壓、低氧血癥和死亡,PTX可改善這種改變;2.PTX可以抑制LPS導致的炎性因子釋放、MPO活性上升以及ICAM-1mRNA的表達,但是增強I

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