脂氧素A4及其類似物BML-111對脂多糖構建的先兆子癇模型的治療作用及其可能的作用機制.pdf

1、研究背景:先兆子癇(pre-eclampsia,PE)是以高血壓和蛋白尿為特征的一種妊娠特有的綜合征1,在美國其發(fā)病率占所有妊娠的5％-8%2。然而,PE確切病因和發(fā)病機制現(xiàn)在仍不清楚,分娩仍然是唯一有效的治療方法。大量的文獻表明給妊娠大鼠注射低劑量內毒素能模擬出人先兆子癇典型的臨床癥狀3,4,5,一氧化氮及其衍生物在此先兆子癇模型的發(fā)生過程中發(fā)揮著重要作用5。另外,臨床資料表明PE患者體內氧化應激水平升高6。脂氧素(Lipoxins,

2、LXs)是第一個內源性的抗炎促消退的一類花生四烯酸的代謝產物,近來研究表明其具有抗氧化應激的作用7。同時PE患者體內LXs的含量很低,所以我們認為LXs可能通過抑制炎癥或氧化應激對胎盤的損傷來緩解PE的癥狀。
　　目的:探討脂氧素A4及其類似物BML-111對先兆子癇的治療作用及其可能的作用機制。
　　方法:在大鼠妊娠第14天尾靜脈注射1μg/kg脂多糖(Lipo poly saccharide,LPS)構建PE模型。20只

3、SD大鼠隨機分為三組:對照組(Control組),脂多糖組(LPS組)和脂氧素組(LPS+BML-111組)。連續(xù)監(jiān)測妊娠大鼠的血壓;BCA法檢測24h平均尿蛋白量;蘇木素-伊紅(Hematoxylin&Eosine,HE)染色法觀察胎盤和腎臟的形態(tài)學變化。用人早孕絨毛外滋養(yǎng)細胞系(TEV-1)進行體外實驗,實驗分為四組:Control組,LPS組,LPS+LXA4組和LPS+LXA4+Boc-2組。MTT法檢測TEV-1細胞的活力;流

4、式細胞儀檢測TEV-1細胞的凋亡率。脂質過氧化試劑盒來檢測胎盤組織,血清和TEV-1細胞中丙二醛(MDA)的水平;RT-PCR檢測胎盤組織和TEV-1細胞中超氧化物歧化酶(SOD),過氧化氫酶(GPx)和血紅素加氧酶(HO-1)基因的表達情況;WesternBlotting檢測胎盤組織和TEV-1細胞中磷酸化激活的細胞外調節(jié)蛋白激酶(p-Erk)和核因子-κB(NF-κB)蛋白的表達情況。
　　結果:(1)LPS組妊娠大鼠的血壓和

5、24h平均尿蛋白量在妊娠第15,17,19天均顯著增加,并且胎盤和腎出現(xiàn)以胎盤絨毛血管壁增厚和腎小球內皮細胞淋巴細胞聚集為特征的形態(tài)學變化(與對照組相比,p<0.05)。BML-111能有效緩解LPS所造成的損傷(與LPS組相比,p<0.05)。
　　(2)LPS組妊娠大鼠胎盤組織和血清中MDA水平顯著增加,胎盤組織中SOD、GPx和HO-1基因表達減弱,胎盤組織中p-Erk和NF-κB蛋白表達增強(與對照組相比,p<0.05)。

6、BML-111能有效逆轉這些變化(與LPS組相比,p<0.05)。
　　(3)與對照組相比,LPS組TEV-1細胞的活力下降和凋亡率明顯增加(p<0.05);LXA4能逆轉LPS對TEV-1細胞增值的抑制作用和抑制LPS刺激的TEV-1細胞的凋亡(與LPS組相比,p<0.05);Boc-2部分阻斷LXA4的保護作用(與LPS+LXA4組相比,p<0.05)。
　　(4)與對照組相比,LPS組TEV-1細胞中MDA水平顯著增加

7、,SOD、GPx和HO-1基因表達減弱,p-Erk和NF-κB蛋白表達增強(p<0.05)。LXA4能有效逆轉這些改變(與LPS組相比,p<0.05),Boc-2部分阻斷LXA4的作用(與LPS+LXA4組相比,p<0.05)。
　　結論:給妊娠大鼠尾靜脈注射低劑量LPS可以構建PE模型。LXA4能有效緩解PE的癥狀,可能的機制是通過降低ERK的活性來抑制氧化敏感的轉錄因子NF-κB,進而增加抗氧化酶類(SOD,GPx和HO-1)