15-差向異構(gòu)體-脂氧素A4對脂多糖誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響及其機制研究.pdf

1、目的：探討15-差向異構(gòu)體-脂氧素A4（15-epimer-lipoxin A4，15-epi-LXA4）對脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的小鼠小膠質(zhì)細胞株BV-2細胞活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）產(chǎn)生的影響及其機制。
　　 方法：以100ng/ml LPS刺激體外培養(yǎng)的BV-2細胞成為炎癥模型，15-epi-LXA4 預(yù)處理BV-2細胞30min后再用LPS刺激B

2、V-2細胞，酶標(biāo)儀檢測BV-2細胞ROS的熒光值；提取細胞漿和細胞膜的蛋白，免疫印跡法檢測細胞漿和細胞膜上p47phox 蛋白的表達量，以及共聚焦免疫熒光法直接觀察BV-2細胞內(nèi)p47phox 蛋白膜移位的情況。
　　 結(jié)果：100ng/ml LPS可以刺激BV-2細胞ROS的產(chǎn)生，激活NADPH氧化酶的活性，使p47phox由細胞漿轉(zhuǎn)移到細胞膜。而15-epi-LXA4 可以降低LPS誘導(dǎo)的ROS的生成；與LPS處理組相比較，

3、p47phox的細胞膜上的蛋白表達量減少，胞漿內(nèi)的p47phox 蛋白表達量增多。共聚焦免疫熒光可直接觀察到LPS處理后p47phox在細胞膜上的熒光值較對照組高，而15-epi-LXA4 預(yù)處理組細胞膜上的p47phox 相比LPS處理組熒光值減低。
　　 結(jié)論：15-epi-LXA4 可以抑制LPS誘導(dǎo)的BV-2細胞內(nèi)ROS的生成，抑制NADPH氧化酶亞基p47phox的膜移位，抑制其激活，從而對小膠質(zhì)細胞發(fā)揮抗炎癥和促炎癥