APOE對脂多糖誘導(dǎo)NMO樣星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的影響.pdf

1、目的：探討APOE對脂多糖誘導(dǎo)小鼠脊髓片星形膠質(zhì)細(xì)胞NMO樣損傷的影響。
　　方法：⑴把7天大的C57BL/6乳鼠分成兩組：野生型（WT）組和基因敲除型（ApoE-/-）組。分別用振動(dòng)切片機(jī)橫向切取兩組乳鼠脊髓切片放到transwell中培養(yǎng)，每三天換一次培養(yǎng)液。⑵培養(yǎng)到第7天兩組脊髓片都用脂多糖處理，同時(shí)設(shè)立不加LPS的正常對照組，脂多糖孵育的第5天后，取各組脊髓片免疫熒光檢測脊髓片水通道蛋白4（AQP4）、膠原纖維酸性蛋白（G

2、FAP）及小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物Iba1的表達(dá)并在免疫熒光鏡下觀察損傷的表現(xiàn)及損傷評(píng)分。⑶進(jìn)一步用ELISA技術(shù)檢測各組組織培養(yǎng)液中免疫學(xué)相關(guān)因子TNF-a表達(dá)情況。⑷用硝酸還原酶法檢測各組組織培養(yǎng)液中炎性介質(zhì)NO的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①對照組、WT組、APOE-/-組比較，脂多糖造模后免疫熒光鏡下觀察APOE-/-組小鼠脊髓片的損傷最明顯，免疫熒光的評(píng)分最高，而WT組次之，對照組的免疫熒光評(píng)分最低。評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;

3、與對照組比較，WT組和APOE-/-組Iba1的表達(dá)均升高且APOE-/-組比WT組升高更明顯。②ApoE-/-LPS組、WT-LPS組、對照組 TNF-α濃度分別是55.90±6.41pg/ml、27.42±5.54pg/ml、5.09±1.34pg/ml（n=10)-x± s其他組組織培養(yǎng)液中TNF-α濃度均較對照組高，且ApoE-/-組比WT組高。③ApoE-/-LPS組、WT-LPS組、對照組NO濃度分別64.46±8.14μm

4、ol/L、42.29±4.70μmol/L、25.54±4.28μmol/L（n=10)-x± s其他組組織培養(yǎng)液中NO濃度均較對照組高，且ApoE-/-組比WT組高。
　　結(jié)論：⑴脂多糖刺激小鼠脊髓片可以激活小膠質(zhì)細(xì)胞破壞星形膠質(zhì)細(xì)胞，造成NMO樣病理改變。⑵缺少APOE的脊髓片免疫熒光下觀察顯示出更嚴(yán)重的損傷。⑶APOE缺乏導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞過度活化，TNF-ɑ，NO等炎癥因子的表達(dá)升高，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，可能是APOE起到保護(hù)神經(jīng)的