活性氧在細菌脂多糖致畸中的作用.pdf

1、1、前景/目的 細菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)是革蘭氏陰性細菌及其它微生物細胞壁中的特有結(jié)構(gòu)，廣泛存在于人和動物的消化道內(nèi)。在嚴(yán)重創(chuàng)傷、腸道感染和飲酒等應(yīng)激狀態(tài)下，病灶內(nèi)細菌釋放大量LPS，引起血液LPS濃度迅速升高，誘發(fā)內(nèi)毒素血癥。婦女孕期感染誘發(fā)自然流產(chǎn)和早產(chǎn)，試驗動物孕期接觸LPS引起胚胎吸收、早產(chǎn)、宮內(nèi)胎兒死亡和生長發(fā)育遲緩。本課題研究LPS對ICR小鼠的致畸作用，并探討活性氧(ROS)在LP

2、S致畸中的作用。 2、方法 本研究共有兩組實驗組成。實驗一，孕鼠被隨機分為4組。LPS低、中、高劑量組孕鼠分別于受孕第8～12 d每天經(jīng)腹腔注射相應(yīng)劑量的LPS(10，20，30μg/kg)，對照組經(jīng)腹腔注射等容量的生理鹽水。所有孕鼠于受孕第18 d處死，記錄著床數(shù)、活胎、死胎和吸收胎數(shù)及外觀畸形胎仔數(shù)，稱量活胎體重，測量活胎鼠身長和尾長，評價胎鼠骨骼發(fā)育情況。實驗二，單純LPS處理組孕鼠于受孕第8 d經(jīng)腹腔注射20μg

3、/kgLPS，間隔8 h再次經(jīng)腹腔給予20μg/kg LPS；LPS+PBN組孕鼠于每次給予LPS前30 min經(jīng)腹腔注射100 mg/kg自由基捕獲劑2-苯叔丁基硝酮(PBN)；對照組經(jīng)腹腔注射等容量生理鹽水或PBN。末次LPS處理后6 h剖殺半數(shù)孕鼠，檢測母鼠血清和羊水一氧化氮(NO)水平，分析母肝、胎盤和胚胎組織丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)含量及胎盤組織硝化酪氨酸(NT)殘留。其余孕鼠于受孕第18 d剖殺，記錄著床數(shù)

4、、活胎、死胎和吸收胎數(shù)、外觀畸形胎仔數(shù)，稱量活胎體重，測量活胎鼠身長和尾長，評價胎鼠骨骼發(fā)育情況。 3、結(jié)果 受孕第8～12d連續(xù)給予LPS(10～30 μg/kg,i.p.)，低劑量(10 μg/kg)、中劑量(20 μg/kg)和高劑量(30 μg/kg)組胎鼠外觀畸形率分別為12.5％、34.9％和17.4％，出現(xiàn)畸胎孕鼠百分率分別為41.7％、61.9％和77.8％，LPS中劑量和高劑量組胎鼠外觀畸形率和出現(xiàn)畸胎

5、孕鼠百分率均顯著高于生理鹽水對照組(P<0.01)；LPS引起的外觀畸形類型主要為露腦或腦膜膨出。此外，低、中、高劑量組分別有28.9％、77.8％和80.8％的胎鼠出現(xiàn)骨骼畸形。受孕第8 d間隔8 h經(jīng)腹腔注射給予孕鼠兩次相同劑量(20μg/kg)LPS，39.1％胎鼠發(fā)生外觀畸形，出現(xiàn)畸形胎鼠的孕鼠百分率為76.5％，骨骼畸形發(fā)生率達76.6％；自由基清除劑PBN預(yù)處理明顯抑制母鼠血清和羊水NO含量、對抗LPS引起的母肝和胎盤組織脂