線粒體在活性氧誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡中的作用.pdf

1、首先,應(yīng)用過氧化氫處理腸上皮細(xì)胞系SW-480細(xì)胞建立活性氧誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡的體外模型.結(jié)果顯示,過氧化氫處理特別是濃度為4mmol/L時(shí):(1)腸上皮細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞變小變圓、細(xì)胞核染色質(zhì)凝集、核固縮及凋亡小體樣等典型凋亡樣形態(tài)學(xué)改變;(2)線粒體出現(xiàn)腫脹、內(nèi)嵴減少或消失、基質(zhì)透明呈氣球樣等超微結(jié)構(gòu)改變;(3)與結(jié)構(gòu)變化一致,腸上皮細(xì)胞凋亡明顯增加,并伴有細(xì)胞線粒體呼吸功能明顯受抑.以上結(jié)果表明活性氧可誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡,線粒體結(jié)構(gòu)和功

2、能的改變與細(xì)胞凋亡密切相關(guān).其次,在該模型的基礎(chǔ)上,觀察了4mmol/L及400μmol/L兩種濃度過氧化氫對(duì)線粒體相關(guān)分子Bcl-2及Bax表達(dá)、ERK-1、凋亡分子細(xì)胞色素C及AIF以及線粒體膜電位、線粒體轉(zhuǎn)位的影響,初步探討線粒體與活性氧誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡的關(guān)系.結(jié)果顯示,過氧化氫處理后:(1)腸上皮細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減弱,與Bcl-2蛋白表達(dá)的趨勢(shì)相反,Bax蛋白表達(dá)明顯增加,相對(duì)于Bcl-2及Bax單獨(dú)的變化,Bcl-

3、2與Bax比例下降更加明顯;(2)腸上皮細(xì)胞ERK-1蛋白表達(dá)明顯減弱;(3)腸上皮細(xì)胞AIFmRNA表達(dá)明顯增加及細(xì)胞色素C釋放明顯增加;(4)腸上皮細(xì)胞線粒體分布從一種分散、兩極化或者近乎對(duì)稱的分布轉(zhuǎn)為一種不對(duì)稱呈串樣的分布,并出現(xiàn)塊狀線粒體聚集;(5)腸上皮細(xì)胞線粒體膜電位明顯下降.結(jié)果表明:線粒體與活性氧所致腸上皮細(xì)胞凋亡關(guān)系密切,Bcl2家族特性改變及線粒體膜通透性轉(zhuǎn)變所致凋亡分子的釋放是活性氧所致腸上皮細(xì)胞凋亡的重要分子基礎(chǔ)