多烯紫杉醇誘導細胞凋亡與活性氧關系的研究.pdf

1、以急性髓細胞(AML)白血病細胞株HL60和慢性髓細胞(CML)人紅白血病細胞株K562為模型,建立了多烯紫杉醇誘導白血病細胞凋亡體系.通過比較多烯紫杉醇誘導兩種細胞凋亡及產(chǎn)生活性氧(ROS)的差異以及兩種細胞抗氧化體系的變化,進一步研究了兩種細胞產(chǎn)生的ROS與凋亡的關系.同時,以K562為對象,建立了多烯紫杉醇誘導K562細胞凋亡的數(shù)學模型.結果顯示,①多烯紫杉醇對兩種細胞的抑制作用具有濃度依賴性和時間依賴性;②K562對藥物作用的響

2、應時間比HL60延后24h,表現(xiàn)出一定的耐藥性;③多烯紫杉醇誘導HL60產(chǎn)生ROS,在24h達到高峰,同時O2-在24h后大量分泌在細胞外并在36小時到高峰;④多烯紫杉醇引起HL60胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性顯著變化.⑤DPI、CAT和NAC的加入能顯著降低HL60細胞的凋亡率.DMSO的加入沒有顯著變化.結果表明K562細胞具有很好的抗氧化防御體系,能及時清除由多烯紫杉醇誘導產(chǎn)生的ROS,從而降低了對細胞的

3、毒性;和K562相比,HL60抗氧化防御體較弱.多烯紫杉醇引起HL60胞內(nèi)ROS的急劇上升,產(chǎn)生的ROS反過來又參與了細胞的凋亡.參與細胞凋亡的ROS的主要成分為O2-和H2O2.流式細胞儀結果顯示,多烯紫杉醇作用下,K562總細胞數(shù)以及各個周期的細胞總是以指數(shù)的形式增長或衰退,同時出現(xiàn)m期的積累和凋亡.數(shù)學模型結果表明能夠引起K562細胞m期積累的最大多烯紫杉醇濃度為17.9631nM;能誘導凋亡的最大藥物濃度為7.8192nM.m期