視神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)及其特征觀察.pdf

1、該課題成功地體外培養(yǎng)、分離、純化P<,2>期小鼠管內(nèi)段視神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞,觀察了生物學(xué)特性,為進(jìn)一步研究視神經(jīng)的損傷和移植提供可靠材料.目的:管內(nèi)段視神經(jīng)是視神經(jīng)損傷的常見(jiàn)部位,不同部位的視神經(jīng)其膠質(zhì)細(xì)胞和組成和承擔(dān)的作用亦不同,正確獲得P<,2>期小鼠管內(nèi)段視神經(jīng),體外培養(yǎng)、分離、純化P<,2>期小鼠視神經(jīng)星表膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞,觀察純化的星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性,為進(jìn)一步研究視神經(jīng)的損傷和移植提供可靠

2、材料.方法:在手術(shù)顯微鏡下分別經(jīng)顱開(kāi)眶和經(jīng)眼眶外側(cè)開(kāi)眶兩種手術(shù)方法獲取P<,2>期小鼠管內(nèi)段視神經(jīng)2mm,組織塊直接培養(yǎng)P<,2>期小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,利用搖床振蕩法分離純化星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞,特異性蛋白(膠質(zhì)原纖維酸性蛋白-GFAP,髓鞘堿性蛋白-MBP)標(biāo)記,免疫組化方法染色,間接免疫熒光標(biāo)記,流式細(xì)胞儀檢測(cè)其相關(guān)特性.結(jié)論:經(jīng)顱開(kāi)眶是快速獲得P<,2>期小鼠管內(nèi)段視神經(jīng)的較好方法,組織塊直接培養(yǎng)P<,2>期小鼠視神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞