膠質(zhì)細(xì)胞多巴胺反應(yīng)基因克隆及其特征分析.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文膠質(zhì)細(xì)胞多巴胺反應(yīng)基因克隆及其特征分析姓名：石軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：組織學(xué)與胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：蔡文琴2001.5.1鄧紋狀體，藏干來(lái)源懿培養(yǎng)星形蔽質(zhì)維胞cAMP積漿。進(jìn)一步疵用窀生理穢放射性配體結(jié)合奏顯影研究提示膠質(zhì)維飚凝有DA受體。我們應(yīng)爝【3H】DA放慰性受體分析法(radieceptorbindingassay，RRA)研究發(fā)現(xiàn)三令不同部位來(lái)溪熬凝形膠鼴綱鼴具有5個(gè)不弱的解離常數(shù)，表明膠質(zhì)細(xì)胞分奪廣泛囂晝

2、獒有部位異矮特性。運(yùn)贛靜研究穰耀分子生物學(xué)技術(shù)如PCR秘原健雜交，歪實(shí)培養(yǎng)紋狀體黢質(zhì)緇飚表達(dá)D幫D2受俸。舅矯，跤矮纓魔具有類熬神經(jīng)元垂冬DA攝取系統(tǒng)。由范可覓，膠溪縮脆怒腦肉DA乍瘸黲重要耗纓鼴，并雖膠震纓脆可鏈在DA神經(jīng)系統(tǒng)疾病中菇有；i常霪要數(shù)俸用。吉零礤究零l蹋纓腿與分子生物學(xué)翡多耱技術(shù)方法，克隧與鏊定系列膠矮纓腿DA的耱關(guān)基因，薺對(duì)部分薪基爨功能遴行初步熊特往分毒廳。一方瑟，從理論上毒到予分援DA裕翅予星形膠質(zhì)緇胞的分子梳箭，

3、了勰膠震綱腿在DA神經(jīng)系統(tǒng)孛鯰生理功能；另一方覆，可能獲得DA系統(tǒng)疾痣熬攘關(guān)基因，對(duì)揭示糖金森氏瘸，精神分裂癥幫藥秘敲癮等痰病的痣毅，提巍蝰湊診叛以及治療水平有夔要蠡冬黢瑙價(jià)德。本硬突首先鐵大鬣弦綴織分離蹬養(yǎng)星形液矮綱魏，爨多融胺DA處理后提取mRaNA，然螽結(jié)合寢感李露鍘游減雜交(Supressionsubtractivehybridization，SSH)秘選擇性差異；；|；迭(PCRSelectDifierentialScreen

4、ing)方法，分離獲褥27個(gè)DA調(diào)節(jié)表達(dá)eDNA殼隆。經(jīng)Northern雜交驗(yàn)證，序列測(cè)定與生物信怠學(xué)分櫥，齷確了14個(gè)DA調(diào)節(jié)表達(dá)靜基因，包括神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)擺關(guān)懿多功能調(diào)節(jié)蛋翻泛索蛋自連接酶Nedd4，滿節(jié)細(xì)胞分泌活動(dòng)戇癌袋鼴鈣聯(lián)結(jié)蛋叁，能璧鋱謝褶關(guān)豹蘩萄糖調(diào)節(jié)蛋自，DA代謝稻關(guān)酶NAD(P)H醌逐原酶幫NADH泛醞氧耽還黎酶，戩及鐵蛋自H亞單位等。實(shí)驗(yàn)結(jié)采提暴(I)DA激活了膠溪縮魏肉復(fù)雜的信號(hào)傳遞通貉，并羹涉及生長(zhǎng)囂子傣號(hào)途徑、辮體