藍(lán)萼乙素抑制小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究藍(lán)萼乙素（Glaucocalyxin B, GLB）對(duì)脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激的小膠質(zhì)細(xì)胞的抗炎作用及其作用機(jī)制，探討藍(lán)萼乙素對(duì)炎癥介質(zhì)引起的神經(jīng)毒性的保護(hù)作用。
　　方法：利用脂多糖刺激的BV-2細(xì)胞和原代小膠質(zhì)細(xì)胞，分別用Griess法和ELISA法測(cè)定細(xì)胞上清液中一氧化氮（NO）和腫瘤壞死因子（TNF-α）的濃度，MTT法測(cè)定細(xì)胞活性；Real-time PCR法檢測(cè)炎癥因子iN

2、OS、COX2、TNF-α和IL-1β的基因表達(dá)情況；Western blot法檢測(cè)iNOS、COX2蛋白表達(dá)，IκBα的磷酸化和降解，MAPKs蛋白磷酸化；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的水平；免疫熒光法觀察核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的核轉(zhuǎn)位情況；小膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元共培養(yǎng)方法檢測(cè)藍(lán)萼乙素對(duì)神經(jīng)元活性的影響。
　　結(jié)果：藍(lán)萼乙素能夠顯著抑制激活的BV-2細(xì)胞和原代小膠質(zhì)細(xì)胞中NO以及TNF-α的釋放，并且能顯著降低細(xì)胞內(nèi)ROS的水

3、平；藍(lán)萼乙素能顯著抑制炎癥因子iNOS、COX2、TNF-α和IL-1βmRNA水平的表達(dá)，并且能夠降低iNOS和COX2蛋白水平的表達(dá)；在LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞中，藍(lán)萼乙素可以抑制IκBα的磷酸化和降解，NF-κB的核轉(zhuǎn)位以及p38 MAPK的磷酸化；藍(lán)萼乙素能降低激活的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)原代神經(jīng)元的細(xì)胞毒性作用。
　　結(jié)論：藍(lán)萼乙素通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的核轉(zhuǎn)位以及p38 MAPK的磷酸化而產(chǎn)生抗炎作用并對(duì)炎癥介質(zhì)介