藍萼甲素生物素標記物合成.pdf

1、藍萼甲素是唇形科香茶菜屬植物藍萼香茶菜提取出來的二萜化合物，是藍萼香茶菜中的主要活性成分。近年來，對此種二萜類化合物抑制腫瘤，抗病毒抑菌，對心血管系統(tǒng)保護及抗癌活性研究，已經(jīng)成為當代天然藥物化學的研究熱點之一。而生物素-親和素系統(tǒng)是一種具有高親和力、靈敏度高、特異性強和穩(wěn)定性好的信號放大標記技術(shù)，由于該標記技術(shù)具有優(yōu)秀的性質(zhì)，因此很快滲透到很多個學科，在細胞和抗原的定位和檢測有相當重要的作用。
　　本文首先對生物素與6-氨基己酸、

2、3-氨基苯甲酸、對氨基苯甲酸、4-氨基-3-甲基苯甲酸、3-氟-4-氨基苯甲酸反應(yīng)得出5種不同的生物素延長鏈，生物素與6-氨基己酸延長后再次與6-氨基己酸反應(yīng)形成第6種生物素延長鏈。然后生物素以及6種不同生物素延長鏈與藍萼甲素進行酯化反應(yīng)。一共得出14個不同的藍萼甲素生物素標記。并且對部分藍萼甲素生物素標記物進行體外抗腫瘤活性測試，初步得出了抗腫瘤活性較好的藍萼甲素生物素標記物。在藍萼甲素生物素標記物的合成過程中，發(fā)現(xiàn)了藍萼甲素生物素標

3、記物?；谀承┤軇┲锌梢园l(fā)生7位羥基以及14位羥基之間相互轉(zhuǎn)移，因此以生物素直接連接藍萼甲素的產(chǎn)物Y1-1(14位羥基取代)和Y1-2(7位羥基取代)分別進行溶劑變構(gòu)實驗，實驗表明Y1-1以及Y1-2濃度為0.5 mg?ml-1在甲醇、二甲基亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷、三氯甲烷、三溴甲烷中，二氯甲烷、三氯甲烷、三溴甲烷有相對明顯的?；D(zhuǎn)移效應(yīng)，而在甲醇也有微弱的?；D(zhuǎn)移效應(yīng)，在DMSO、DMF中基本不發(fā)生?；D(zhuǎn)移

4、效應(yīng)。另外我們也發(fā)現(xiàn)了與藍萼甲素具有類似結(jié)構(gòu)的冬凌草甲素，在生物素化后的產(chǎn)物Y11-1(14位羥基取代)、Y11-2(7位羥基取代)，其0.5 mg?ml-1的三氯甲烷溶液中也有微弱的?；D(zhuǎn)移效應(yīng)。同時也發(fā)現(xiàn)了0.5 mg?ml-1的藍萼乙素和0.5 mgml-1藍萼丁素能在三氯甲烷溶液中相互變化。但是生物素化后的藍萼丙素卻不能發(fā)生類似的?；D(zhuǎn)移現(xiàn)象，由此初步得出藍萼甲素?；D(zhuǎn)移的化學條件以及初步的反應(yīng)機理。藍萼甲素生物素標記物的合成為