大黃素生物素酯的合成、表征及抑菌機理研究.pdf

1、大黃素(emodin)是一種蒽醌類化合物，主要存在于中草藥虎杖中。大黃素毒副作用低，不易產(chǎn)生耐藥性，且具有抗菌消炎、抗氧化、抗腫瘤等多種生物活性，但因其作用機理尚不明確限制了大黃素的開發(fā)應(yīng)用。作用靶點的分析對于深入了解藥物的作用機理及新藥的研發(fā)具有重要的意義。本研究以 DCC低溫催化法、二步酰氯法通過酯化反應(yīng)連接大黃素與生物素，首次獲得大黃素生物素酯，并以金黃色葡萄球菌為供試菌株，對大黃素和大黃素生物素酯的抑菌活性進行了測定，同時對大黃

2、素、大黃素生物素酯的抑菌機制進行了系統(tǒng)研究，為進一步分析大黃素的作用靶點及新型抗菌藥物的研發(fā)奠定理論和實驗依據(jù)。
　　結(jié)果顯示大黃素和大黃素生物素酯對金黃色葡萄球菌都具有較強的抑菌活性，大黃素生物素酯對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度為5μg/mL，大黃素的最低抑菌濃度為6μg/mL，同物質(zhì)量濃度的大黃素生物素酯的抑菌活性是大黃素的2.4倍。
　　本研究測定了細菌培養(yǎng)液電導(dǎo)率的變化及細胞內(nèi)DNA和RNA的外滲情況，結(jié)果表明：大黃

3、素、大黃素生物素酯均對金黃色葡萄球菌的細胞膜產(chǎn)生了較大的損傷。
　　大黃素、大黃素生物素酯作用金黃色葡萄球菌后，大黃素作用組比對照組可溶性蛋白含量減小了10.12％，大黃素生物素酯作用組比對照組可溶性蛋白含量減小了7.89%；大黃素作用組的DNA含量較空白減少了21.4%，大黃素生物素酯作用組的DNA含量比空白減少了5.45%。說明大黃素、大黃素生物素酯均可抑制菌體的可溶性蛋白及核酸的合成。
　　此外，大黃素、大黃素生物素酯

4、對菌體總蛋白含量和菌體外分泌蛋白含量都有明顯的影響。
　　本文采用紫外可見分光光度光譜法研究大黃素、大黃素生物素酯與DNA的相互作用方式。結(jié)果表明大黃素、大黃素生物素酯與金黃色葡萄球菌的DNA分子發(fā)生了相互作用，大黃素、大黃素生物素酯均以嵌插模式與DNA發(fā)生作用。
　　熒光光譜分析顯示，DNA對大黃素、大黃素生物素酯的熒光產(chǎn)生了猝滅作用，進一步表明其嵌入到了DNA的堿基對之間。
　　大黃素、大黃素生物素酯二者與DNA都