益腦素改善學(xué)習(xí)記憶功能的作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　通過東莨菪堿、亞硝酸鈉以及乙醇分別建立記憶獲取障礙模型、記憶鞏固障礙模型和記憶再現(xiàn)障礙模型，并采用中藥提取物益腦素進(jìn)行干預(yù)，觀察益腦素對于大腦記憶行為的保護(hù)作用。并以此為基礎(chǔ)，探究益腦素對記憶重要相關(guān)因子谷氨酸、γ-氨基丁酸和乙酰膽堿酯酶的影響。并且探討益腦素對于突觸前膜因子Syp和突觸后膜蛋白PSD-95的影響。
　　方法:
　?、倮肕orris水迷宮實(shí)驗(yàn)，探究益腦素對正常小鼠記憶能力的影響;
　

2、?、诶肕orris水迷宮實(shí)驗(yàn)及跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，探究益腦素對東莨菪堿造成的記憶獲取障礙模型的影響;
　　③利用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，探究益腦素對亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙模型的影響;
　　④利用跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，探究益腦素對乙醇造成的記憶再現(xiàn)障礙模型的影響;
　?、堇脰|莨菪堿造小鼠記憶障礙模型，探究益腦素對神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影響，以及對乙酰膽堿酯酶活性的影響;
　　⑥利用東莨菪堿造小鼠記憶障礙模型，使用免疫組化技術(shù)、We

3、stern Blotting及RT-PCR技術(shù)，探究益腦素對于突觸前膜突觸囊泡蛋白及突觸后膜致密結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　①正常小鼠記憶能力的影響，Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常組比，吡拉西坦片組、益腦素高劑量組動(dòng)物逃避潛伏期顯著縮短;吡拉西坦片組、益腦素高、中劑量組動(dòng)物穿臺(tái)次數(shù)顯著增加;吡拉西坦片組、益腦素高劑量組動(dòng)物平臺(tái)周邊活動(dòng)路程和時(shí)間或中央活動(dòng)路程和時(shí)間均顯著增加。
　?、趯|莨菪堿造成的記憶獲

4、取障礙模型的影響，Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常組相比，模型組動(dòng)物逃避潛伏期顯著延長，平臺(tái)周邊活動(dòng)路程和時(shí)間顯著縮短，穿臺(tái)次數(shù)顯著減少中央活動(dòng)路程和時(shí)間也有所縮短，提示模型動(dòng)物出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶障礙。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素高、中、低組動(dòng)物逃避潛伏期顯著縮短，平臺(tái)周邊活動(dòng)路程和時(shí)間或中央活動(dòng)路程和時(shí)間均有不同程度的增加。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常組相比，模型組動(dòng)物潛伏期縮短，錯(cuò)誤次數(shù)、錯(cuò)誤動(dòng)物數(shù)顯著增加，提示動(dòng)物出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶障礙。與模

5、型組相比，吡拉西坦片組、益腦素高、中劑量組動(dòng)物潛伏期有所延長，錯(cuò)誤次數(shù)也有減少的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?、蹖喯跛徕c造成的記憶鞏固障礙模型的影響，跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常組相比，模型組動(dòng)物潛伏期縮短，錯(cuò)誤次數(shù)、錯(cuò)誤動(dòng)物數(shù)顯著增加，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中、高劑量組組動(dòng)物潛伏期有所延長，錯(cuò)誤次數(shù)也有減少的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?、軐σ掖荚斐傻挠洃浽佻F(xiàn)障礙模型的影響，跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與正常

6、組相比，模型組動(dòng)物潛伏期縮短，錯(cuò)誤次數(shù)、錯(cuò)誤動(dòng)物數(shù)顯著增加，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中劑量組動(dòng)物錯(cuò)誤次數(shù)顯著減少，益腦素低劑量組動(dòng)物潛伏期、錯(cuò)誤動(dòng)物只數(shù)顯著減少。
　?、輰ι窠?jīng)遞質(zhì)谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影響，以及對乙酰膽堿酯酶活性的影響:與正常組相比，模型組動(dòng)物AChE活性顯著增強(qiáng)，Glu及γ-GABA含量顯著降低，提示造模成功。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、中、高劑量組動(dòng)物AChE活性顯著

7、減少，吡拉西坦片組、益腦素低劑量組動(dòng)物Glu及γ-GABA含量顯著增加。
　　⑥對突觸前膜突觸囊泡蛋白及突觸后膜致密結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)的影響:與正常組相比，模型組動(dòng)物Syp基因表達(dá)量顯著下降，PSD-95基因表達(dá)量顯著上升。與模型組相比，吡拉西坦片組、益腦素低、高劑量組動(dòng)物Syp基因表達(dá)量顯著增加，益腦素低、中劑量組動(dòng)物PSD-95基因表達(dá)量顯著降低。WB實(shí)驗(yàn)結(jié)果與基因表達(dá)量有著相同的趨勢。
　　結(jié)論:
　　益腦素能夠增強(qiáng)正