豬睪丸和附睪精子冷凍—解凍處理對(duì)體外受精和多精受精的影響.pdf

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文豬睪丸和附睪精子冷凍—解凍處理對(duì)體外受精和多精受精的影響姓名：殷駿申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：李躍民20070501兩南大學(xué)碩七學(xué)伊論文 中文摘要％( 3 3 ／8 0 ) ，差異不顯著( p > O ．0 5 1 ；與冷凍一解凍附睪精于卵裂率相比加．5 ％( 3 4 ／8 4 ) ，冷凍一解凍鮮精卵裂率為1 3 ．5 ％( 1 0 ／7 8 ) ，差異顯著( po ．0 5 ) ，冷凍一解凍附

2、睪精子與鮮精一樣具有受精能力，且受精能力沒(méi)有差異。3 、豬四種不同來(lái)源精子體外多精子受精現(xiàn)象觀察：分別對(duì)4 種不同來(lái)源的精子進(jìn)行體外獲能處理。計(jì)數(shù)精子濃度為1 0 6 個(gè)／m l ，與體外成熟卵母細(xì)胞在體外用傳統(tǒng)微滴法進(jìn)行受精，受精8 ～l O h 后，固定，觀察進(jìn)入卵母細(xì)胞的精子，統(tǒng)計(jì)多精受精率，受精1 8 小時(shí)后，固定，用H 3 3 3 4 2 染色，統(tǒng)計(jì)單精受精率。結(jié)果表明：冷凍一解凍附睪精子單精受精率7 ．2 ％( 6 ／8 4

3、 )比鮮精子單精受精率3 5 ．5 ％( 2 7 ／7 8 ) 低，差異顯著( po ．0 5 ) ；兩者的多精子受精比率分別為4 6 ．2 ％( 3 6 ／7 8 ) 和5 1 ．8 0 ／o ( 4 1 ／8 0 ) ，差異不顯著( p > o ．0 5 ) 。冷凍一解凍附睪精子單精受精率7 ．2 ％( 6 ／8 4 ) 比冷凍一解凍鮮精單精受精率5 ．2 ％( 4 ／7 8 1 高，差異不顯著( p > 0 ．0 5

4、) 。冷凍一解凍附睪精子多精受精率7 0 ．2 ％( 5 9 ／8 4 ) 比冷凍一解凍鮮精多精受精率6 5 ．7 ％( 5 1 ／7 8 ) 高，差異不顯著( p > o ．0 5 ) 。綜上所述：在體外受精過(guò)程中，4 種來(lái)源的精子經(jīng)過(guò)獲能處理后其活率變化為：冷凍一解凍附睪精子6 5 ．2 ％( 2 ．6 X 1 0 4 ／4 X1 0 4 ) 、未冷凍的附睪精子8 2 ．3 ％( 3 ．3 ×1 0 4 ／4 X 1

5、 0 4 ) 、冷凍一解凍鮮精子4 5 ．5 ％( 1 ．8 ×1 0 4 ／4 X 1 0 4 ) 、未冷凍的鮮精子8 5 ．0 ％( 3 ．4 X | 0 4 ／4 X 1 0 ．) ；頂體完整率分別為：冷凍一解凍附睪精子4 3 ．2 ％( 1 ．7 X 1 0 4 ／4 ×1 0 4 ) 、未冷凍的附睪精子6 2 ．3 ％( 2 ．5 X1 0 4 ／4 Xl 曠1 、冷凍一解凍鮮精子4 0 ．8 ％( 1 ．

6、6 X 1 0 4 ／4 X1 0 4 1 、未冷凍的鮮精子6 6 ．4 ％( 2 ．6 X 1 0 4 ／4×l o * ) ；說(shuō)明冷凍一解凍附睪精子對(duì)“冷應(yīng)激”不敏感，相比之下冷凍一解凍后的精子頂體膜破壞較嚴(yán)重。4 種來(lái)源的精子以卵裂率為受精能力檢測(cè)指標(biāo)經(jīng)過(guò)正常的體外受精處理后，四種來(lái)源精子的卵裂率分別為：鮮精4 3 ．7 ％( 3 4 ／7 8 ) ，附睪精子4 2 ．3 ％( 3 3 ／8 0 ) ，冷凍一解凍附睪精子

7、4 0 ．5 ％( 3 4 ／8 4 ) ，冷凍一解凍鮮精1 3 ．5 ％( 1 0 ／7 8 ) ：說(shuō)明附睪精子具有正常的受精能力，且附睪精子受精能力與鮮精比較，差異不顯著( p > o ．0 5 ) 。冷凍一解凍附睪精子單精受精率為7 ．2 ％( 6 ／8 4 ) ，冷凍一解凍鮮精單精受精率為5 ．2 ％( 4 ／7 8 ) ，所以冷凍一解凍鮮精單精受精率比附睪精子低，差異不顯著( p > o ．0 5 ) ，這是由于冷