豬精液冷凍和體外受精的研究.pdf

1、本實驗對五指山豬精液冷凍做了改進(jìn)，對IVM-IVF培養(yǎng)體系以及甲．期胚胎發(fā)育環(huán)境進(jìn)行了探索，實驗結(jié)果如下： 1．五指山豬精液冷凍的研究·利用液氮熏蒸法進(jìn)行顆粒凍精，以解凍后的精子活力、活率和頂體完整性為判斷標(biāo)準(zhǔn)，(1)比較了4種不同冷凍保護(hù)液對五指山豬精液冷凍的影響，結(jié)果表明：2組，3組冷凍保護(hù)液以氨基酸代替部分糖類物質(zhì)，解凍后精子3個判斷標(biāo)準(zhǔn)均顯著高于1組(P<0.05)；4組(2.5mlDMSO)冷凍保護(hù)液解凍精子的活力和活

2、率顯著低于2組(2ml甘油)和3組(1.25mlDMSO+1ml甘油)(P<0.05)。(2)降溫平衡時間2h(4℃)組精液解凍后精子活力顯著高于平衡5h(17℃3h+4℃2h，)組(P<0.05)。(3)精清保留量為0ml/10ml時解凍精子的活率和活力顯著低于保留0.5ml/10ml和1ml/10ml(P<0.05)。(4)干解法解凍后精子活率顯著高于濕解法(P<0.05)。 2．體外受精和早期胚胎發(fā)育的研究比較了不同基礎(chǔ)培

3、養(yǎng)液對卵母細(xì)胞體外成熟和體外受精胚胎早期發(fā)育的影響，冷凍精液和正常精液對受精和早期胚胎發(fā)育的影響以及添加中藥成分對早期胚胎發(fā)育的影響。實驗證明：(1)NCSU-23培養(yǎng)基在卵母細(xì)胞成熟(75.45％)方面顯著優(yōu)于TCM-199(64.38％)(P<0.05)，二者對于促進(jìn)早期胚胎發(fā)育(囊胚率10.24％和9.42％)差異不明顯(P>0.05)。(2)冷凍精液體外受精的受精率(67.96％)、桑椹胚率(44.66％)與新鮮精液受精率(67

4、.41％)、桑椹胚率(45.09％)無顯著差異(P>0.05)；鮮精受精囊胚率(10.27％)顯著高于凍精(4.37％)(P<0.05)。(3)體外受精胚胎培養(yǎng)液中添加體積比0.10％的中藥肉從蓉和0.10％的黃芪，肉蓯蓉添加組囊胚率(15.76％)顯著高于空白組(9.26％)(P<0.05)，黃芪添加組囊胚率(10.09％)與空白組(9.26％)差異不顯著(P<0.05)，表明肉蓯蓉能夠顯著促進(jìn)早期胚胎發(fā)育。(4)肉蓯蓉添加濃度(V/