四種糖類對豬精液冷凍保存效果的研究.pdf

1、由于豬精子冷凍后成活率、人工授精繁殖率較低，使得豬精液冷凍保存技術(shù)難以得到推廣。為了進(jìn)一步提高冷凍-解凍后豬精液品質(zhì)和精子抵抗低溫打擊的能力，本試驗(yàn)以甘露醇、絞股藍(lán)多糖、馬齒莧多糖和海帶多糖作為冷凍保護(hù)劑，以冷凍解凍后精子的活力、活率、線粒體活性、質(zhì)膜完整率和頂體完整率作為評價(jià)指標(biāo)，利用碘化丙啶(PI)、羅丹明123、低滲腫脹試驗(yàn)(HOST)和異硫氰酸熒光素連接的花生凝集素(PITC-PNA)分別檢測了精子的活力、線粒體活性、質(zhì)膜完整率

2、和頂體完整率。同時(shí)研究了不同的冷凍前處理和甘油含量對精液冷凍后精子的活力、活率、線粒體活性、質(zhì)膜完整率和頂體完整率以及冷凍解凍對抗氧化酶活性的影響，得到如下結(jié)果： 1.豬精液冷凍過程中，在傳統(tǒng)的稀釋液TCG基礎(chǔ)上，添加2 mg/mL，的甘露醇、0.25-0.5mg/mL的絞股藍(lán)多糖、0.25 mg/mL的馬齒莧多糖、0.5-1.5 mg/mL的海帶多糖均可提高豬精子凍后活力、活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線粒體活性(P<0.05

3、)。整體來看，海帶多糖的保護(hù)效果較好。 2.在對精液冷凍前預(yù)處理中：采用先平衡，后棄精漿的精液處理程序；棄去6/7的精漿；稀釋液中甘油濃度為3％，分別含有2 mg/mL甘露醇、0.5 mg/mL絞股藍(lán)多糖、0.25 mg/mL馬齒莧多糖和1mg/mL海帶多糖時(shí)，均取得了較好的冷凍解凍效果(p<0.05)。 3.平衡、冷凍解凍對精子內(nèi)SOD、CAT和GSH-Px酶活力都有影響。整個(gè)冷凍過程中，精子內(nèi)三種酶活力均呈下降趨勢；

4、添加不同濃度的三種多糖，以TCG作為對照，檢測平衡后和冷凍解凍后精子內(nèi)SOD、CAT、GSH-Px三種酶的活力。平衡后，絞股藍(lán)多糖添加組和馬齒莧多糖添加組中，精子內(nèi)三種酶活力與對照組比較差異不顯著(p>0.05)；添加0.5和1.0 mg/mL海帶多糖的精子中SOD活力下降的較少(p<0.05)；添加1.0mg/mL的海帶多糖時(shí)，CAT酶活力與對照組比較差異顯著(p<0.05)。冷凍解凍后，添加0.5mg/mL-1.0 mg/mL絞股藍(lán)