納米化處理紅景天多糖對豬精液冷凍效果的影響.pdf

1、本試驗(yàn)在以往研究的基礎(chǔ)上,添加新型的冷凍保護(hù)劑—納米化紅景天多糖(Nonomaterials Rhodiola Sachanensis Polysaccharide,NRSP),探索其對豬精液冷凍保護(hù)的效果,以及添加的最適濃度,初步探討了納米化紅景天多糖的冷凍保護(hù)機(jī)制及對冷凍程序進(jìn)行優(yōu)化,以期提高豬精液冷凍效率,為該技術(shù)的成熟應(yīng)用提供理論參考。研究結(jié)果如下:
　　1、在冷凍稀釋液中分別添加體積分?jǐn)?shù)為1％、5%、10%、15%、20

2、%濃度的納米化紅景天多糖,以添加6mg/L濃度的紅景天多糖為實(shí)驗(yàn)對照組,無添加組為空白對照組。冷凍-解凍后,檢測精液質(zhì)量,結(jié)果表明體積分?jǐn)?shù)為15%的納米化紅景天多糖添加組精子質(zhì)量最好,活力、頂體完整率、質(zhì)膜完整率分別為0.69、51.42%、25.95%均顯著高于其他組(P<0.05),A型精子百分率最高,精子活率為96%,顯著高于其它組(P<0.05);在冷凍稀釋液中添加紅景天多糖及納米化紅景天多糖,冷凍-解凍后精液中SOD含量上升,

3、添加20%體積分?jǐn)?shù)的納米化紅景天多糖組的SOD含量最高,為343.05mgprot,顯著高于空白對照組(P<0.05),添加15%體積分?jǐn)?shù)納米化紅景天多糖和6mg/L紅景天多糖組冷凍-解凍后精液MDA含量最低,分別為11.60nmol/ml、10.83nmol/ml,顯著低于其他添加組及空白對照組(P<0.05);
　　2、添加15%體積分?jǐn)?shù)納米化紅景天多糖與不同濃度甘油配伍,結(jié)果表明,當(dāng)甘油添加終濃度為3%時(shí),精子活力、頂體完整

4、率、質(zhì)膜完整率、活率均顯著高于無甘油組及2%終濃度的甘油配伍組(P<0.05),且2%終濃度甘油添加組的精子冷凍效果明顯優(yōu)于無甘油添加組(P<0.05);添加15%體積分?jǐn)?shù)納米化紅景天多糖與不同濃度卵黃相配伍,當(dāng)卵黃添加濃度為20%和30%時(shí),冷凍-解凍后精子活力、頂體完整率、質(zhì)膜完整率顯著高于10%濃度卵黃添加組(P<0.05),但20%卵黃添加濃度和30%卵黃添加濃度在精子頂體完整率和質(zhì)膜完整率方面沒有顯著差異(P>0.05);

5、r>　　3、選取5個(gè)不同的冷凍高度(1cm、3cm、5cm、7cm、9cm)分別冷凍豬精液,檢測冷凍-解凍后精子活力、頂體完整率、質(zhì)膜完整率及不同運(yùn)動狀態(tài)的精子,結(jié)果發(fā)現(xiàn),3cm組冷凍-解凍后精子活力、頂體完整率、質(zhì)膜完整率最高,并顯著高于其他冷凍高度(P<0.05),其中1cm和9cm冷凍高度組精子活力低于0.3,不適合用于豬精液冷凍保存中。3cm組解凍后A型精子比例最高,說明冷凍高度為3cm時(shí),解凍后精子運(yùn)動狀態(tài)最好;精子預(yù)平衡過程

6、中常溫平衡及17℃平衡,冷凍-解凍后精子活力及膜結(jié)構(gòu)完整率均無顯著差異(P>0.05);測試了冷凍過程中精液過濾后、17℃平衡后、添加冷凍Ⅰ液平衡后、添加冷凍Ⅱ液平衡后及冷凍-解凍后精液pH、活率及畸形率,發(fā)現(xiàn)冷凍前各步驟之間均無顯著差異(P>0.05),解凍后精液質(zhì)量迅速下降,且差異顯著(P<0.05);
　　4、比較了不同解凍溫度和解凍時(shí)間對精子質(zhì)量的影響,結(jié)果表明,52℃×9s解凍組解凍后精子質(zhì)量最好,精子活力、頂體完整率、

7、質(zhì)膜完整率顯著高于其他解凍組(P<0.05),且同一溫度下不同解凍時(shí)間之間精子質(zhì)量差異顯著(P>0.05);解凍液中添加不同濃度紅景天多糖及納米化紅景天多糖,平衡相同時(shí)間后,15%體積分?jǐn)?shù)的納米化紅景天多糖添加組和2mg/L紅景天多糖添加組活力最好,但未見明顯優(yōu)勢(P>0.05),解凍液中添加15%體積分?jǐn)?shù)的納米化紅景天多糖解凍后精子頂體完整率和質(zhì)膜完整率顯著好于其他添加組(P<0.05);選擇15%體積分?jǐn)?shù)的納米化紅景天多糖與卵黃配伍