藏獒精液冷凍技術的初步研究.pdf

1、為了提高藏獒精液冷凍后的品質，本研究以藏獒為實驗材料，對藏獒精液冷凍和解凍的方法進行了初步探討。利用預實驗選出的三組稀釋液制作顆粒凍精，然后解凍。結果表明A液和B液的精子活率相比較，差異不顯著(P＞0.05)，但與C液活率相比較差異顯著(P＜0.05)。精子活力亦得出類似的結果。頂體完整率A液優(yōu)于B液和C液，差異顯著(P＜0.05)。稀釋液A中分別添加不同濃度的復合VB和VC(濃度均為0，2.5，5，7.5)，結果表明，A液中分別添加一

2、定量的復合VB或Vc不但能夠提高冷凍-解凍精子的活率和活力，而且對頂體有保護作用。分別對4只藏獒鮮精進行不同轉速(0，1000，1500，2000和2500r/min)離心去精清處理。A液沖洗4次后冷凍，然后解凍。結果1500r/min和2000r/min離心處理組精液經冷凍再解凍后的精子活率和活力顯著高于其它轉速處理組(P＜0.05)，但頂體完整率1500r/min顯著高于其它轉速的處理組和對照組(P＜0.05)。
　　 精子

3、在冷凍前，隨著甘油作用時間的延長，精子的活力呈逐漸下降趨勢，從凍前的0.83±0.017下降到作用60min時的0.51±0.038；精液經平衡-冷凍-解凍后，精子的活力隨著甘油作用時間的延長呈現先升高后降低的變化規(guī)律，在平衡15min與平衡30min時的凍后精子活力差異不顯著(P＞0.05)，與平衡45min和60min時的凍后活力差異顯著(P＜0.05)，在甘油中平衡15min和30min時有較高的精子凍后活力。5只藏獒12次的射精

4、量以三種劑型(顆粒、0.25ml的細管和0.2ml離心管)的方式進行冷凍，以精液凍后的存活率、活力和頂體完整率作為指標衡量精液的冷凍效果。結果顆粒冷凍與細管型、離心管精子的存活率、活力和頂體完整率相比較，前者高于后者(P＜0.05)，但細管冷凍與離心管冷凍相比較，精子凍后存活率、活力和頂體完整率差異均不顯著(P＞0.05)。因此，顆粒冷凍優(yōu)于細管冷凍和離心管冷凍。
　　 采用液氮熏蒸法和細管炸熏法兩種冷凍方式進行細管冷凍試驗。結

5、果炸熏法冷凍和液氮熏蒸法冷凍后的精子活率分別為52.69±4.14％和43.78±6.23％，活力分別為0.46±0.07和0.35±0.04，頂體完整率為58.34±8.28％和52.8±4.71％，差異均顯著(P＜0.05)。因此，炸熏法冷凍精液優(yōu)于液氮熏蒸法冷凍。
　　 在精液置于液氮面上方1～5cm之間，隨著高度的增加，解凍后精子的活率、活力和頂體完整率明顯下降(P＜0.05)，精液置于液氮上方1，3和5cm冷凍時，解凍

6、后精子的活率分別為45.68±5.14％，38.42±4.18％和19.47±6.19％；活力分別為0.38±0.12，0.27±0.05和0.14±0.08；頂體完整率43.72±1.21％，36.32±1.09％和20.42±2.76％，差異均顯著(P＜0.05)。試驗表明，降低精液到液氮液面的熏蒸高度有利于提高藏獒精液冷凍保存的效果。
　　 通過兩種解凍溫度的比較，40℃的水浴快速解凍法解凍已冷凍的精液后，精子活率、活力和