鞣花酸對豬精液常溫保存效果的研究.pdf

1、豬的人工授精技術(shù)是規(guī)模化生豬養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)之一，而精液保存質(zhì)量則是保證人工授精成功率與母豬產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)鍵因素之一。豬精液體外保存的方式有三種，即常溫保存、低溫和冷凍保存。由于豬精子細胞膜的膽固醇/磷脂較低，精子對于溫度相對敏感，對低溫的耐受能力較差，因此，在生產(chǎn)實踐中多采用豬精液常溫保存技術(shù)保存精液。然而，在常溫保存過程中精子細胞內(nèi)會產(chǎn)生過量的氧自由基(ROS)，對精子質(zhì)膜和頂體完整性造成氧化損傷，使精子的運動能力和活力降低，導致精液保存

2、品質(zhì)和人工授精成功率降低。為了降低ROS對于精子的損傷，提高精液保存質(zhì)量，為此本研究向豬精液常溫保存稀釋液Modena中添加了一種天然植物提取物抗氧化劑——鞣花酸。本研究利用計算機輔助精子質(zhì)量分析儀(CASA)、熒光顯微鏡、多功能酶標儀等儀器，檢測鞣花酸對大白豬精液常溫保存效果的影響并探究其作用途徑;同時研究了鞣花酸對于豬精子冷打擊的保護作用;以期減緩豬精液保存過程中產(chǎn)生的氧化應激、延長精液有效保存時間，同時為我國精液保存抗氧化劑的研發(fā)

3、提供科學資料。本研究獲得如下重要結(jié)果:
　　1.將Modena稀釋液分為6組分別添加不同濃度的鞣花酸，1∶1稀釋精液（鞣花酸終濃度為:0、15、25、35、50、75μmol/L），并檢測保存1、3、5、7、9d的精子活、質(zhì)膜及頂體的完整情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn):15、25μmol/L的鞣花酸均能提高精子的保存質(zhì)量;而且，當鞣花酸添加濃度為25μmol/L時，保存7d的精子活力為66.63％，質(zhì)膜完整率為84.05％、頂體完整率為87.07

4、％，均顯著優(yōu)于其他處理組（P＜0.05）;精子的快速前進行性運動率(PRO)、平均直線運動速率(VSL)和精子平均路徑速度（VAP）顯著高于對照組（P＜0.05）;此外，精子平均曲線運動速率(VCL)與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)。這些結(jié)果表明，鞣花酸對于豬精液常溫保存具有保護作用，最佳添加濃度為25μmol/L。
　　2.檢測常溫保存7d后精子細胞內(nèi)ROS、脂質(zhì)過氧化水平和總抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)25μmol/L鞣花酸處理組的

5、ROS和脂質(zhì)過氧化水平最低，總抗氧化能力最高，且與對照組相比結(jié)果顯著(P＜0.05)。提示鞣花酸能夠通過清除精子細胞內(nèi)ROS、降低脂質(zhì)過氧化水平和提高總抗氧化能力的途徑來保護精子，緩解常溫保存過程中精子的氧化損傷。
　　3.在豬精子由體溫快速降溫至5℃的過程中，發(fā)現(xiàn)豬精子活力大幅下降，在精子遭受冷打擊時，鞣花酸對精子活力的影響與對照組相比結(jié)果不顯著，表明鞣花酸保護豬精子免受冷打擊損傷的作用不顯著。
　　綜上，本研究證明在豬精