青島市黃島區(qū)腎綜合癥出血熱的流行特征研究.pdf

1、目的：
　　通過對青島市黃島區(qū)膠南地區(qū)鼠、鼩鼱、人的漢坦病毒(Hantavirus，HV)帶毒率和血清學檢測并分析其結果，掌握該地區(qū)腎綜合征出血熱的(Hemorrhagicfever with with renal sydrome，HFRS)流行規(guī)律，并制定防制對策。
　　方法：
　　1.HFRS病人的實驗室診斷、臨床特征及流行病學特征。收集由青島市黃島區(qū)疾控采集的2012-2013年腎綜合征出血熱疑似病人急性期血清標

2、本106份，并對部分病人采集了恢復期血清，將病人的臨床資料和信息等記錄下來。對疑似病人急性期血清提取總RNA，根據(jù)2005年《全國腎綜合征出血熱監(jiān)測方案（試行）》[29]設計引物，通過巢式RT-PCR法對所有鼠肺標本檢測HV的M和S片段，將擴增出來的陽性片段進行測序并用MEGA5.0軟件進行同源性序列比較并構建系統(tǒng)發(fā)生樹。同時用ELISA方法檢測病人急性期和恢復期血清HV-IgM抗體和HV-IgG抗體。
　　2.正常人血清中HV-

3、IgG檢測采集黃島地區(qū)發(fā)病率較高地區(qū)的正常人血清，使用雙抗原夾心法檢測正常人血清中HV-IgG抗體，獲得正常的人群血清中HV-IgG抗體陽性率。
　　3.嚙齒動物野鼠、家鼠和食蟲動物鼩鼱體內(nèi)HV RNA及抗體檢測2012年12月-2013年11月采用夾夜法捕捉黃島區(qū)室內(nèi)和室外的嚙齒動物和鼩鼱。每次獲得樣本后，鑒定動物種類、性別，然后解剖取肺臟，用潔凈濾紙蘸取心臟血。切取肺組織，提取肺組織總RNA后使用巢式引物擴增HV的S，M片段的

4、RNA進行測序;用75μl PBS清洗蘸取動物心臟血的濾紙片，用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測動物心臟血中的HV-IgG抗體。
　　結果：
　　1.采集119例HFRS病人血清，其中急性期血清106份，20例病人急性期血清HV-IgM抗體陽性，陽性率為18.9％(20/106)，恢復期血清90份，15例病人HV-IgG抗體陽性，陽性率為16.7％(15/

5、90);同時具有急性期與恢復期血清的病人共有77人，其中有18人急性期血清抗體陽性，陽性率為23.4％(18/77)，有15人恢復期血清抗體陽性，陽性率為19.5％(15/77)，雙份血清都陽性的共有8人，陽性率為10.4％(8/77)。在106份急性期血清中，檢測到存在漢灘病毒(Hataanvirus，HTNV)RNA的血清2份，陽性率為1.89％。
　　2.總共調(diào)查黃島區(qū)正常人448名，年齡分布在16～92歲，年齡中位數(shù)60歲

6、，男女比例為1∶1.09，不同年齡組間性別分布無顯著性差異。448份正常人血清中，20份抗體檢測陽性，HV總抗體陽性率為4.46％(20/448)。
　　3.2012-2013年捕獲1276只嚙齒動物和食蟲動物，ELISA檢測出253份HV感染陽性標本，血清學陽性率為19.8％。隨機選取750份動物標本經(jīng)RT-PCR擴增，其中30份標本HV RT-PCR陽性，其中漢城型病毒（Seoul virus，SEOV）型和HTNV型各占2.