重組9型腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞.pdf

1、目的:觀察攜帶增強型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒(rAAV9-eGFP)對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的轉(zhuǎn)染效率。
　　方法:將攜帶增強型綠色熒光蛋白基因的重組9型腺相關(guān)病毒以不同感染復(fù)數(shù)(1×105，1×106，1×107)轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的第4代小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，并在轉(zhuǎn)染后1-7 d連續(xù)用熒光倒置顯微鏡觀察骨髓間充質(zhì)干細胞中增強型綠色熒光蛋白陽性表達情況，尋找最佳感染條件;采用流式細胞儀檢測最佳感染復(fù)數(shù)下攜帶增強型綠色熒光蛋白

2、基因的重組9型腺相關(guān)病毒對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的轉(zhuǎn)染效率。
　　結(jié)果:轉(zhuǎn)染后第1天，感染復(fù)數(shù)為1×107組可見增強型綠色熒光蛋白開始表達，轉(zhuǎn)染后第2天，感染復(fù)數(shù)為1×105、1×106組開始表達;各組增強型綠色熒光蛋白表達強度隨感染復(fù)數(shù)值的增高而增強，同時增強型綠色熒光蛋白的表達強度隨著時間延長而逐漸增強;轉(zhuǎn)染后第5天達到高峰，此時感染復(fù)數(shù)為1×107組轉(zhuǎn)染效率約8％。
　　結(jié)論:重組腺相關(guān)病毒rAAV9-eGFP對小鼠BM