哮喘分期序貫治療對(duì)氣道重構(gòu)的ASMC增殖周期調(diào)控機(jī)制影響的研究.pdf

1、目的:探討分期序貫治療對(duì)哮喘氣道重構(gòu)時(shí)氣道平滑肌細(xì)胞(ASMC)增殖周期的調(diào)控機(jī)制，為哮喘的防治提供新的思路。
　　 方法:采用腹腔注射和重復(fù)霧化吸入卵清白蛋白法復(fù)制前期哮喘大鼠模型，各組大鼠支氣管一肺組織行HE染色和天狼猩紅染色，經(jīng)光學(xué)顯微鏡和圖像分析系統(tǒng)觀察分析支氣管內(nèi)管壁、氣道平滑肌層和上皮層的病理改變，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組大鼠ASMC增殖周期中相應(yīng)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白(CCRP)的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:1、觀察發(fā)

2、現(xiàn)哮喘模型組（X組）大鼠進(jìn)行激發(fā)前（第15天）漸現(xiàn)明顯過敏反應(yīng)（如頭部瘙癢、抓鼻、躁動(dòng)不安），激發(fā)一周后（第29天）逐漸出現(xiàn)躁動(dòng)不安、打噴嚏、嗆咳、前肢縮抬、呼吸加快或俯臥少動(dòng)、飲水增多、毛發(fā)漸漸枯槁發(fā)黃而無光澤。激發(fā)到兩周后（第36天）大鼠出現(xiàn)精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、節(jié)律性收腹樣喘促，甚至出現(xiàn)雙耳及口唇紫紺，更有甚者喘促至死等。其他各治療組與X組比較，過敏反應(yīng)輕微，嗆咳，噴嚏等癥狀均較X組大鼠輕微，呼吸稍有增快，但未見明顯喘促;正常對(duì)照組

3、（Z組）大鼠行動(dòng)敏捷，呼吸平穩(wěn)，精神狀態(tài)良好，皮毛有光澤。2、組大鼠肺組織HE染色可見支氣管上皮細(xì)胞腫脹、脫落、增厚、結(jié)構(gòu)紊亂、杯狀細(xì)胞及黏液腺增加，黏膜下層亦有顯著增厚;支氣管平滑肌細(xì)胞增生活躍，平滑肌細(xì)胞收縮，管腔狹窄;上皮下及平滑肌周圍有大量的膠原沉積。部分肺泡壁變薄或者斷裂，甚者融合為肺大泡。支氣管壁周圍、管腔內(nèi)及血管周圍有大量炎性細(xì)胞浸潤，氣道壁及氣道、以嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為主;各個(gè)治療組與X組相比較，炎癥反應(yīng)較輕，支氣管

4、及肺泡炎性浸潤也不明顯，肺泡間隔僅有部分?jǐn)嗔?，黏膜結(jié)構(gòu)也較為完整。膠原沉積和氣道壁各層厚度也較X組輕。而Z組HE染色切片支氣管皺裝完整，組織結(jié)構(gòu)正常，無支氣管痙攣表現(xiàn)。肺泡大小較一致，肺泡壁薄，肺泡腔無滲出，管腔內(nèi)無滲出物，無出血、充血，周圍無明顯炎癥反應(yīng)。3、大鼠(WAm/Pi)，(WAi/Pi)，(WAc/Pi)較Z組有明顯增加，差異有顯著性。各個(gè)治療組(WAm/Pi)，(WAi/Pi)，(WAc/Pi)均較X組減少，差異有顯著性;

5、各治療組(WAm/Pi)，(WAi/Pi)，(WAc/Pi)均較Z組增加，差異有顯著性;4、大鼠ASMC內(nèi)正性CCRPcyclinA，cyclinB的表達(dá)水平高于Z組，負(fù)性CCRPP27kip-1的表達(dá)水平低于Z組;各治療組與X組及Z組的比較:各治療組大鼠ASMC內(nèi)正性CCRPcyclinA和cyclinB的表達(dá)水平低于X組、高于Z組;負(fù)性CCRPP27kip-1的表達(dá)水平則高于X組、低于Z組;各治療組組間比較:對(duì)于正性CCRPcycl

6、inA的上調(diào)作用，序貫治療1組（A1組）、序貫治療2組（A2組）與序貫治療3組（A3組）依次減弱，且均弱于孟魯司特組（M組），而A3組與布地奈德組（B組）相比較差異無顯著，而A1組和A2組均弱于B組;各中藥組大鼠ASMC內(nèi)正性CCRPcyclinB的表達(dá)水平依次降低，且均低于M組，其中B組大鼠ASMC內(nèi)正性CCRPcyclinB的表達(dá)水平與A2組相比差異無顯著性，但高于A3組而低于A1組的表達(dá)水平;A1組、A2組、A3組大鼠ASMC內(nèi)負(fù)

7、性CCRPP27kip-1的表達(dá)水平顯著高于M組及B組，其中A2組與A3組相比差異無顯著性，但均高于A1組。
　　 結(jié)論:(1)哮喘時(shí)氣道平滑肌層顯著增厚，存在氣道重構(gòu)現(xiàn)象;(2)哮喘氣道重構(gòu)時(shí)ASMC的異常增殖可能與ASMC內(nèi)G1/S和G2/M限制點(diǎn)的正性CCRP表達(dá)上調(diào)和負(fù)性CCRP表達(dá)下調(diào)有關(guān);(3)溫肺化痰—化痰養(yǎng)陰—滋陰補(bǔ)腎的分期序貫治療法可通過下調(diào)哮喘ASMC內(nèi)正性CCRPcyclinA和cyclinB的表達(dá)和上調(diào)負(fù)