fFN與自發(fā)性早產(chǎn)的相關(guān)性研究.pdf

1、背景:
　　早產(chǎn)占全球總出生率的6％~10%,每年大約有1300萬早產(chǎn)兒并且有100萬早產(chǎn)兒死亡,準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)和診斷自發(fā)性早產(chǎn)是非常困難的[1,2]。早產(chǎn)仍是產(chǎn)科尚未解決的難題。在所有的新生兒中,早產(chǎn)兒的死亡率占到75%,50%長期患有神經(jīng)障礙疾病的為早產(chǎn)兒[3]。早產(chǎn)是新生兒死亡和患病的重要因素,對(duì)新生兒以后的健康成長也產(chǎn)生了長期的不良影響,而且由于輔助生殖技術(shù)的運(yùn)用和多胞胎的增加,早產(chǎn)率在全球范圍都存在上升趨勢(shì)。及早施行有目的的

2、治療,能很好的利用有效資源和避免不必要的干預(yù)?，F(xiàn)今圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展并未降低早產(chǎn)的發(fā)生率,行之有效的預(yù)測(cè)和診斷早產(chǎn)的方法還有待進(jìn)一步研究和建立。有效的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估因子可能通過有及早的治療來改善預(yù)后,而且也可有效的利用資源并減少不必要的干預(yù)。胎兒纖維連接蛋白fFN檢測(cè)在臨床應(yīng)用方面具有快速、成本低廉、操作簡(jiǎn)便等諸多優(yōu)勢(shì)。
　　胎兒纖維連接蛋白(fetal Fibronectin,fFN)是一種存在于羊膜、蛻膜和絨毛膜基質(zhì)的糖蛋白,為胎盤和子

3、宮的連接起支持作用。在正常情況下,fFN在宮頸陰道分泌物中含量很少,在懷孕22周以前,可以在宮頸陰道分泌物中檢測(cè)到fFN,但是在孕22周到35周時(shí),正常情況下是不能檢測(cè)到fFN的,若在懷孕22周后,在陰道分泌物中測(cè)到fFN的含量>50ng/ml,提示患者有很大的早產(chǎn)可能。說明絨毛膜和蛻膜面可能有剝離,孕婦有早產(chǎn)的可能。在臨床上也進(jìn)行了許多陰道分泌物fFN和發(fā)生早產(chǎn)相關(guān)性的研究.fFN在自發(fā)性早產(chǎn)中可能起到了重要調(diào)節(jié)作用,具體機(jī)制仍需進(jìn)一

4、步的研究和探索,但目前類似研究較少。因此,本實(shí)驗(yàn)擬通過探索fFN在自發(fā)性早產(chǎn)中的的作用,進(jìn)一步闡明fFN在自發(fā)性早產(chǎn)中的分子機(jī)制,為自發(fā)性早產(chǎn)的治療提供新的思路和方法。
　　目的:
　　觀察fFN、MMP-9、COX-2在自發(fā)性早產(chǎn)患者胎盤組織中的表達(dá)及意義,并分析fFN與MMP-9和COX-2之間的關(guān)系。研究fFN在自發(fā)性早產(chǎn)中的分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.fFN、MMP-9、COX-2在胎盤組織中的表達(dá)和

5、意義
　　選擇2012年12月至2013年6月在西京醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的孕婦90例,分為自發(fā)性早產(chǎn)30例,足月順產(chǎn)組30例,擇期剖宮產(chǎn)30例。采取免疫組化法、RT-PCR法和Western blot法檢測(cè)自發(fā)性早產(chǎn)和正常妊娠婦女胎盤組織中的fFN、MMP-9、COX-2的表達(dá)。
　　2.胎盤絨毛組織的原代培養(yǎng)與鑒定
　　收集采取足月產(chǎn)和自發(fā)性早產(chǎn)的胎盤,運(yùn)用胰蛋白酶分離培養(yǎng)原代絨毛細(xì)胞。用免疫熒光方法對(duì)其鑒定。

6、　　3 fFN作用下絨毛細(xì)胞中MMP-9、COX-2的表達(dá)差異
　　運(yùn)用明膠親和層析法提取足月產(chǎn)胎盤羊膜中的fFN,將fFN加入實(shí)驗(yàn)二培養(yǎng)的兩組絨毛細(xì)胞,運(yùn)用Elisa檢測(cè)兩組細(xì)胞中MMP-9、COX-2的變化。
　　結(jié)果:
　　1.fFN、MMP-9、COX-2的陽性表達(dá)主要在滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿中,fFN、MMP-9、COX-2在早產(chǎn)組的陽性表達(dá)率分別為(100%)、(90%)、(93.3%),高于足月順產(chǎn)組(76.7%)

7、、(80%)、(46.7%);高于擇期剖宮產(chǎn)組(56.7%)、(46.7%)、(50%)。fFNmRNA、MMP-9mRNA、COX-2mRNA在早產(chǎn)組中的表達(dá)水平高于足月順產(chǎn)組、擇期剖宮對(duì)照組(P均<0.05)。fFN、MMP-9、COX-2在早產(chǎn)組中的蛋白表達(dá)水平高于足月順產(chǎn)組、擇期剖宮對(duì)照組(P均<0.05)。
　　2.分離培養(yǎng)出純度超過90%的符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的絨毛細(xì)胞。
　　3.足月產(chǎn)絨毛細(xì)胞中MMP-9、COX-