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文檔簡介
1、目的:
(1)通過回顧性前瞻研究,分析自發(fā)性早產(chǎn)中母體外周血有核細胞轉錄組的分子特征;
(2)通過對早產(chǎn)基因mRNA表達譜分析,篩選出差異表達基因,為研究早產(chǎn)分子機制提供線索。
實驗方法:
(1)基因表達譜分析:通過檢測21例原始樣本(10例自發(fā)性早產(chǎn)和11例足月妊娠)的mRNA表達譜,分析早產(chǎn)組和足月組間的基因表達特征,對其數(shù)據(jù)進行整合分析;
(2)實時定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)
2、:根據(jù)基因表達譜分析結果,挑選出13個上調(diào)差異基因,對其在另外46例獨立樣本(21例自發(fā)性早產(chǎn)和25例足月妊娠)中的表達水平進行驗證。
結果:
(1)基因表達譜分析結果:早產(chǎn)組中表達上調(diào)的基因241個,主要參與炎癥、免疫應答、細胞增殖、DNA復制、DNA代謝、RNA剪切、RNA代謝、染色質(zhì)組裝等生物學過程;表達下調(diào)的基因690個,主要參與細胞穩(wěn)態(tài)、信號轉導、離子轉運、核酸分解代謝等生物學過程。
(2)RT-
3、PCR結果:選取差異最大的13個上調(diào)基因在獨立樣本中差異表達分析,早產(chǎn)組中NF1表達水平高于足月組(P<0.05,P=0.008),差異具有統(tǒng)計學意義;早產(chǎn)組中CAMK2D表達水平高于足月組(P<0.05,P=0.028),差異具有統(tǒng)計學意義。
結論:
(1)自發(fā)性早產(chǎn)的發(fā)生過程可能與相關基因激活和抑制有關;
(2)NF1和CAMK2D基因表達異常可能參與早產(chǎn)的病理生理變化,有望成為預測早產(chǎn)的候選分子標志物
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